【操作视频】骨肉瘤的临床前小鼠模型用于研究细胞外囊泡介导的肿瘤和间充质干细胞之间的通讯

大昌华嘉Particle Metrix，纳米颗粒跟踪分析仪

在肿瘤微环境中，原位的或募集的间充质干细胞（MSC）促成多种癌症类型的恶性进展。在特定环境信号的影响下，这些成体干细胞可以释放旁分泌介质，导致肿瘤生长和转移加速。探究肿瘤和间充质干细胞之间的交流对于了解癌症进展的机制以及确定治疗干预的新靶点具有重要意义。

癌细胞产生大量细胞外囊泡（EV），这可以影响肿瘤微环境或远处部位的靶细胞的行为。肿瘤EV包含功能性生物分子，包括炎性RNA和癌症相关的蛋白，其可以教育基质细胞以增强癌细胞的转移行为或参与转移前微环境形成。该论文描述了一种能够特异评估肿瘤和间质干细胞之间EV介导的沟通的临床前癌症小鼠模型的发展。首先，描述了肿瘤分泌EV的纯化和表征，以及MSC对EV摄取的评估。然后，利用免疫测定来评估由癌症EV诱导的MSC细胞因子表达谱的改变。最后，举例说明了骨肉瘤的生物发光原位异种移植小鼠模型，其概括了肿瘤-MSC相互作用，并显示了受EV处理的MSC对肿瘤生长和转移形成的贡献。

该模型提供了探究癌症EV如何塑造肿瘤支持环境的方法，并可评估阻断EV介导的肿瘤和MSC之间的通信是否阻止癌症进展。

Protocol包括：

  1. 肿瘤细胞分泌的细胞外囊泡（EVs）的分离

  2. 肿瘤EVs处理MSCs

  3. EVs的鉴定

  4. EVs摄取实验

  5. MSCs分泌的细胞因子的检测

  6. 骨肉瘤的原位异种移植模型

  7. 肺转的检测

  8. 组织学分析

参考文献：

LagerweijT, Pérez-Lanzón M, Baglio SR. A Preclinical Mouse Model of Osteosarcoma toDefine the Extracellular Vesicle-mediated Communication Between Tumor andMesenchymal Stem Cells. J Vis Exp. 2018 May 6;(135). doi: 10.3791/56932.

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