TRIS的缓冲范围和应用
Tris全名三氢甲基氨基甲烷,属于生物缓冲剂中的一种。外观为白色结晶状粉末,水溶性好,可溶于乙醇、乙酸、乙酯,但不溶于乙醚与四氯化碳。Tris可配置成溶液,Tris缓冲液是一类可以抵制外界少量强酸和强碱的影响,维持体系Ph值不变的溶液。Tris缓冲液在生物化学的研究工作中有着非常重要的意义。
Tris的缓冲范围:
Tris为弱碱,在室温25℃下时,其pKa值为8.1。根据缓冲理论,Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间,0.1mol/l的水溶液pH为10.4,一般加入盐酸用以调节pH值,就可获得所需pH值的缓冲液。但同时需要注意温度对于其pKa的影响并影响Tris缓冲液,温度每降低1℃,pH增加约0.03个单位,浓度每稀释10倍,pH降低0.03-0.05个单位。并且Tris缓冲液非常容易吸收空气中的CO2,所以配制的缓冲液需要密封。此外Tris缓冲液对某些pH电极会产生一定的干扰作用,因此在使用时需要用到与Tris缓冲液具有兼容性的电极。
Tris在缓冲液中的应用:
1、 1M Tris-HCL6.8与1.5M Tris-HCL8.8和5xTris-甘氨酸电泳缓冲液都是SDS-PAGE最常用的试剂。
2、 在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成TE缓冲液,TE缓冲液被用于DNA的稳定和储存。将调节pH值的盐酸换为乙酸既可以得到TAE缓冲液,换成硼酸则获得TBE缓冲液,而TAE与TBE缓冲液都常用于核酸电泳实验中。
3、 Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。
4、 Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫核纤层蛋白的中间纤维的形成。
由此,Tris缓冲液是核酸和蛋白质的溶剂,广泛用于生物化学和分子生物学实验中缓冲液的制备。
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