腺相关病毒（AAV）载体是什么？

腺相关病毒AAV具有表达滴度高、宿主免疫反应轻微、感染谱广、安全性高等优势，成为近年来在基因治疗领域应用广泛的病毒载体之一。（AAV Helper Free Expression System）的AAV三质粒表达系统也是目前常用的一类AAV载体系统。

如下图所示，该套AAV系统包含表达载体（Expression vector）、包装质粒（Rep-Cap plasmid）和辅助质粒（pHelper plasmid）。其中表达载体是AAV病毒的核心，包含了ITR序列、CMV启动子、多克隆位点等，用于携带外源基因；包装质粒负责表达AAV病毒的结构蛋白，决定AAV的血清型和组织嗜性。由于野生型AAV是复制缺陷型的，必须依赖辅助病毒（如腺病毒）才可以感染靶细胞。AAV Helper Free Expression System利用在不同质粒上提供这些必要的辅助基因来确保重组AAV病毒具有感染性，消除AAV对辅助病毒的依赖，解决了AAV生产过程中要去除腺病毒污染的难题。

      Expression vector包含ITR序列，多克隆位点，携带目的基因；

      Rep-Cap plasmid包含Rep和Cap基因，决定了重组AAV的血清型和组织嗜性；

      pHelper plasmid 包含腺病毒的VA、E2A和E4基因，使重组AAV具有感染性。