【进阶篇】高效液相色谱法的原理、构造、故障
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流动相极性小于固定相极性的分配色谱法称为正相分配色谱。常用的分析柱有:氨基柱、氰基柱、硅胶柱。
流动相极性大于固定相极性的分配色谱法称为反相分配色谱法。常用的分析柱有:ODS( C18), C8, C2。
离子色谱法( ion chromatography )
离子色谱是由经典的离子交换色谱发展起来的一种液相色谱技术,利用物质在离子交换柱上迁移的差异而达到分离,用于亲水性阴阳离子的测定。根据是否采用抑制柱,可分为抑制型离子色谱和非抑制型离子色谱。
也称凝胶色谱,依据被分离组分分子尺寸与凝胶空径大小之间的相对关系而分离,类似于分子筛作用。在一定分子线团尺寸内,分子越大,保留时间越短。
对于相同化学组成的高分子化合物,其分子尺寸大小与分子量成正比,因此凝胶色谱可以研究高分子化合物的分子量分布。
表面活性剂在水中超过某一浓度(临界浓度)时,多余的表面活性剂不再溶解,聚集而成胶束(胶粒)。
以胶束分散体系为流动相的色谱法称为胶束色谱法。它的流动相为胶束多相分散体系,不是真溶液;流动相中不含有机溶剂。
因胶束色谱法的流动相是多相分散体系,在整个色谱体系中又增加了一相,故也被称为假相色谱(pseudo phase chromatography)。
用于分离手性药物对映体的一种有效技术,可分为直接法和间接法两类:
手性固定相法(chiral stationary phase;CSP)
手性流动相法(chiral mobile phase additive;CMPA)
手性试剂衍生化法 chiral derivatization reagent,CDR)
过滤溶剂的目的湿防止固体颗粒损伤仪器或柱头;未经过滤的溶剂或者溶剂瓶中生长微生物,都会降低溶剂入口过滤头的寿命,并影响泵的性能,一般要求两天过滤一次。
注意:过滤水相或有机相应该选用不同的滤膜
但是建议不要用于强酸、二氯甲烷和DMF