缓冲剂中三羟甲基甲胺基丙磺酸的一种配置方法
Taps全称:三羟甲基甲胺基丙磺酸,属于生物缓冲剂中的一种。外观为白色晶体粉末,在常温状态下置于空气之中挥发会有刺激气味。水溶性好,平均每100克水可以溶解的TAPS达到50g,也能溶于Na0H碱液,水溶液无色透明。CAS号是29915-38-6,分子式是C7H17N06S,分子量是243.28。
Taps还是一种广泛一个应用于生物化学和分子生物学领域的俩性离子缓冲剂,主要作用于生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒以及PCR诊断试剂盒当中。
目前,有关TAPS的合成工艺报导较少,根据网上资料详细研究了TAPS的合成方法。得出,以三羟甲基氨基甲烷和1,3-丙磺酸内酯为原料,使其在醇类溶剂中反应。
具体操作:称取等摩尔量的Tris和1,3-PS,并取适量醇类溶剂放入250ml带有冷凝回流的三口烧瓶中,搅拌情况下,加热升温并回流;待反应一段时间后,停止反应;在室温下,将反应后的溶液静置冷却至室温后,减压抽滤,TAPS粗滤饼用适量的无水乙醇洗涤2~3次,取出TAPS滤饼,放入真空干燥箱烘干,减压抽滤的滤液回收待用。在上述合成过程中,反应时间、不同的醇溶剂及反应溶剂的循环利用对TAPS收率和纯度均有一定程度影响。
实验结果表明,反应时间控制在6小时,收率最高,继续延长反应时间,收率略微下降;对于考察的乙醇、正丙醇、异丙醇和正丁醇反应溶剂,正丁醇作为反应溶剂的TAPS收率和纯度最高;在反应过程中,反应溶剂的循环利用有利于提升TAPS的收率和纯度。综上所述,采用Tris和1,3-PS为原料合成TAPS,反应时间控制在6小时,采用正丁醇作为溶剂,且在反应过程循环利用,得到的TAPS的收率和纯度最佳。
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