CD4人源化小鼠模型介绍
品系背景:C57BL/6J
品系说明:
CD4在小鼠体内具有正常的生理表达和调节模式:免疫细胞分布和辅助性T细胞活性不变。
小鼠靶基因不表达。
研究应用:
本模型可用于评估hCD4靶向药物在体内的有效性和安全性。
通常用于炎症、自身免疫性疾病、免疫肿瘤学和HIV感染领域。
模型验证:
CD4表达检测
图1. 人源CD4取代了鼠源CD4。
用mAbs(αmCD4,αhCD4)对取自野生型和hCD4小鼠的血样进行标记,并通过流式细胞仪进行分析。在hCD4小鼠的PBMC中能检测到hCD4的表达,但检测不到mCD4的表达。
免疫细胞比例检测
图2. 免疫细胞分布不变。
hCD4小鼠脾脏中B细胞、NK细胞和T细胞的百分比和野生型小鼠的相同。用不同的mAb组合对脾细胞进行标记,通过流式细胞术对淋巴细胞亚群比例进行检测。灰色柱代表野生型小鼠,阴影柱代表hCD4小鼠。
细胞因子表达检测
图3. 细胞因子表达谱:hCD4小鼠在刀豆蛋白A(ConA)刺激后显示与野生型小鼠相似的细胞因子表达水平。先用ConA刺激小鼠脾细胞,然后用3-Plex Luminex试剂盒检测培养上清液中IL-2、IFN-γ和IL-4的浓度。黑色柱代表野生型小鼠,阴影柱代表hCD4小鼠。
Ig型检测
图4. 相似的Ig型:hCD4小鼠显示出与野生型小鼠相似的αKLH抗体同种型(isotype)。在用钥孔血蓝蛋白(KLH)和弗氏佐剂(CFA)免疫野生型(WT)和纯合hCD4小鼠(HO CD4)后的第28天,通过双抗体夹心法(sandwich ELISA)在小鼠血清中检测αKLH特异性IgG1和IgG2b多克隆抗体水平,并根据OD值绘制不同的稀释度。
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