调和营卫对慢性应激抑郁大鼠心脏氧化应激机制及自主神经功能影响

抑郁症与冠心病都是影响全球的常见疾病。随着医疗模式逐渐向“生物一心理-社会”模式转变,精神心理疾病对躯体疾病的影响越来越受到医学界的关注。抑郁症是常见的精神类疾病。据统计,全球范围内,抑郁症的终生罹患率约为3%-16.9%,且没有明显的年龄趋势。冠心病常见于40岁以上人群,但近年来,临床发现冠心病发病年龄具有年轻化的趋势。例如美国心脏协会(American Heart Association,AHA)于2015年发布的指南中明确表明,在青年人中,重症抑郁和双向情感障碍可加快动脉硬化,并诱发早发的心血管疾病。诸多证据表明,抑郁症是心血管疾病的独立危险因素,并且,抑郁症通过自主神经系统等机制与心脏疾病相互影响,加重疾病,严重影响全球患者的生活质量。因此,研究防治抑郁症相关的心脏疾病的课题十分必要。

临床实践中,我们发现采用桂枝汤能缓解抑郁症患者的心脏症状,如惊悸、怔忡、胸闷、胸痛、奔豚等,桂枝汤是临床常用的调和营卫法的代表方剂,因此,推测调和营卫治疗大法可能具有调节情绪,保护心脏的作用,但机制不详。

为系统阐述调和营卫对抑郁症心脏保护的疗效机制,本课题拟通过慢性不可预见性轻度应激(chronic unpredictable mild stess,CUMS)方法制作抑郁大鼠模型,重点观察桂枝汤对抑郁大鼠如下指标的影响:(1)行为学指标(体重、糖水偏好指数、旷场得分);(2)心肌损伤指标(血清CK-MB、BNP含量、心肌细胞光镜形态);(3)氧化及凋亡指标(心肌组织SOD、MDA、Bax、Bcl-2含量、线粒体电镜形态);(4)心脏自主神经功能指标(酪氨酸羟化酶及心电图),以期为临床应用桂枝汤治疗抑郁相关心脏疾病提供理论支持和科学依据。目的:观察桂枝汤对CUMS抑郁模型大鼠抗抑郁、保护心肌细胞及心脏功能的影响,明确调和营卫法对慢性应激抑郁大鼠的心脏保护作用,为调和营卫法治疗抑郁相关的心脏疾病提供重要的理论依据。方法:1.桂枝汤对CUMS抑郁模型大鼠抗抑郁、心肌保护机制初探采用28天CUMS方法建立抑郁大鼠模型,同时给予桂枝汤和阳性药(辅酶Q10)连续灌胃28天。第28天测定体重、糖水偏好指数、旷场得分,评价各组动物抑郁状态,采用血清CK-MB及BNP、心脏病理切片评价抑郁模型大鼠心脏损伤情况,采用Masson染色法观察抑郁模型大鼠心肌细胞结构,同时探讨桂枝汤对抑郁症和受损心肌的可能保护作用及其机制。2.桂枝汤对抑郁模型大鼠的抗氧化、抗凋亡作用初探通过测定正常组、模型组、辅酶Q10组和桂枝汤组大鼠心肌组织中SOD、MDA、Bax和Bcl-2的含量变化,探讨桂枝汤对抑郁模型大鼠损伤心肌抗氧化、抗凋亡机制的保护机制。3.桂枝汤对抑郁模型大鼠调节自主神经功能作用初探采用免疫组化法检测大鼠心肌细胞酪氨酸羟化酶的含量,以及采用心电图观察大鼠心率(律)情况,探讨桂枝汤调节抑郁模型大鼠心脏自主神经功能的作用机制。结果:1.桂枝汤对CUMS抑郁模型大鼠抗抑郁和保护受损心肌的作用(1)CUMS造模28天后,抑郁模型组大鼠体重、旷场实验评分、糖水偏好指数与正常组相比皆明显下降(P<0.001,P=0.021,P<0.001),提示此实验CUMS模型成功模拟了抑郁状态。与抑郁模型组相比,桂枝汤组旷场得分显著高于抑郁模型组(P=0.007);(2)与正常组相比,模型组、辅酶Q10组、桂枝汤组大鼠血清CK-MB及BNP皆显著升高(P<0.001,P=0.001,P<0.001,P0.05)(4)电镜结果提示,正常对照组心肌细胞排列规则,线粒体呈聚集现象,分布整齐,形态正常。模型组心肌细胞排列欠规则,线粒体分布分散且紊乱、可见部分插入心肌肌节,形态异常,线粒体嵴肿胀;桂枝汤组心肌细胞排列尚规则,线粒体聚集,主要分布在心肌肌节周围,形态欠规则,线粒体嵴轻度肿胀。辅酶Q10组心肌细胞排列较为规则,线粒体聚集,但分布欠规则,主要分布于心肌肌节周围,形态欠规则,线粒体崤轻度肿胀。3.桂枝汤对抑郁模型大鼠自主神经功能的调节作用(1)各组组间TH含量均无明显统计学差异(P>0.05);(2)免疫组化染色观察TH结果显示,正常组大鼠心肌胞浆内可见分布均匀的浓密棕黑色颗粒TH阳性细胞,心肌细胞排列整齐;抑郁模型组大鼠心肌细胞胞浆内浓密棕黑色颗粒明显增多,颜色加深,心肌细胞断裂或缺损;辅酶Q10组大鼠心肌细胞胞浆内浓密棕黑色颗粒着色较为均匀,数量较抑郁模型组减少,心肌排列较为整齐;桂枝汤组大鼠心肌细胞胞浆内可见散在分布浓密棕黑色颗粒,着色略浅,心肌排列较为整齐。(3)经28天CUMS造模后,模型组大鼠可探及频繁发作的室性早搏,桂枝汤组大鼠可见房颤现象。

结论:本实验采用CUMS模型建立抑郁模型大鼠,评价了桂枝汤对抑郁大鼠心肌损伤的保护作用,结果显示调和营卫法在抗抑郁的同时,对心脏具有一定保护作用,其疗效机制主要为减少血清心肌损伤标记物,抑制心肌细胞纤维化,促进新生血管再生,减少氧化应激物质,减轻线粒体损伤。...