NVSG高度免疫缺陷小鼠构建技术原理
NVSG特征:
s NOD(non-obese diabetes)遗传背景:自发I型糖尿病;其巨噬细胞对人源细胞吞噬作用弱;先天免疫系统,如补体系统和树突状细胞功能降低。
s Prkdc-scid: Prkdc(protein kinase DNA-activated catalytic)基因突变,小鼠的T和B细胞缺失 ,表现为细胞免疫和体液免疫的重度联合免疫缺陷(severe combined immune deficiency, scid)。
s Il2rgnull:Interleukin-2受体的gamma链(IL-2R γc,又称CD132)是具有重要免疫功能的细胞因子Il2、Il-4、Il-7、Il-9、Il-15和I-21的共同受体亚基,该基因敲除后的小鼠机体免疫功能严重降低,尤其是NK细胞的活性几乎丧失。
优点:
s 迄今世界上免疫缺陷程度最高的工具小鼠;
s 寿命长达1.5年,为实验预留充足的时间。
s 对人源细胞和组织几乎没有排斥反应。
s 少量细胞即可成瘤,节省人力物力和时间。
s 无B淋巴细胞泄漏
s 实验结果精度高,可比性强,反应均一。
科研应用领域:
s 人源细胞或组织移植
s 肿瘤和肿瘤干细胞研究
s ES和iPS细胞研究
s 造血和免疫学研究
s 人类疾病感染模型研究
s 人源化免疫系统重建
表型鉴定:
s FITC Rat Anti-Mouse CD3染色,染T细胞。
s APC Rat Anti-Mouse CD19染色,染B细胞。
s BV421 Rat Anti-Mouse CD335 染色, 染NK细胞。
Wildtype(C57)、NOD和NVSG小鼠实验结果:
FSC-SSC图中可以看出,相比野生型小鼠,NVSG的白细胞分群更为集中,说明细胞类型非常单一;
流式分选及统计结果对比显示:NVSG鼠的T、B、NK细胞表现为高度缺失。