缓冲剂HEPES(7365-45-9)在朊病毒中起到何种作用
HEPES是一种用于细胞培养的缓冲试剂,它的缓冲范围是6.8-8.2之间,在开放式的细胞培养条件中,它的PH值常常会受到外界的影响,如若加入HEPES缓冲剂,即可防止培养基内pH氧化升高,所以在细胞培养过程中,经常少不了HEPES缓冲液。除此之外在有机分子摄取、氧化应激机制的改变或离子的抑制中使用也很广泛。
HEPE的缓冲液,与碳酸氢盐相比,它溶解度更高更稳定的,并且与金属离子的络合最小,在不同的使用情况下证明HEPES可以负责生物技术的重大修改有机分子的吸收等参数,对氧化应激机制和离子通道抑制目前已有几种分子机制。
朊病毒又称朊粒、蛋白质侵染因子、毒朊或感染性蛋白质,是一类能侵染动物并在宿主细胞内复制的小分子无免疫性疏水蛋白质。在我们实验室寻求朊病毒基因治疗方法的过程中,我们使用含有相关蛋白的HEK 293T上清液朊病毒感染细胞上的慢病毒,在对照实验中,单独使用无关的慢病毒或培养基观察到一个显着的抑制作用的积累朊蛋白(PrPSc)的异常亚型最终确认与培养基中HEPE的存在有关。
当在朊病毒感染的细胞上使用添加HEPES的细胞培养基时,有一个显著的浓度依赖性抑制的积累,朊蛋白异常亚型(PrPSc)。这种效应只存在于活细胞中,并且没有被证实被认为与PrP环境或生物学的改变有关。HEPES的这种抑制作用也可以用来防止细胞培养中朊病毒的污染或繁殖。
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