免疫组化实验中,抗原在细胞中的定位类型

免疫组化实验是一种可以通过颜色来原位显示蛋白质的有无及定位(胞外、胞膜、胞浆、胞核)的技术。对于新手来说,如何准确判断蛋白定位是一大难点,今天,小编就将蛋白的定位做一个分类讲解。

第一类:胞膜型表达

阳性染色颗粒主要定位于细胞膜表面。常见的有淋巴细胞膜抗原(如LCA、CD20、CD4、CD8等)、间皮细胞抗原(如MCA、CR、CK5/6等)、细胞膜受体(insulinR、FAS、CD25等)、黏附分子(整合素、干扰素、钙黏蛋白等)、上皮细胞抗原(EMA、ECA、ESA等)等。

左图:E-cadherin在肝癌中胞膜阳性

右图:NTCP在大鼠肝脏中胞膜阳性

第二类:胞核型表达

阳性颗粒定位于细胞核中。常见的有增殖细胞周期抗原(Ki-67、PCNA等)、性激素受体(ER、PR、AR等)、肿瘤相关基因(P53、P27、BRCA1等)、肌核抗原(Myf-3、MyoD1等)、淋巴细胞核抗原(OCT-2、MUM1等)、上皮细胞核抗原(P63、TTF-1等)等。

左图:P53在结肠癌中胞核阳性

右图:PCNA在肺癌中胞核阳性

第三类:胞质型表达

阳性颗粒定位于细胞质。常见的有细胞结构蛋白 (中间丝蛋白、微丝蛋白等)、细胞内酶和功能蛋白(MPO、NSE、PLAP等)、神经内分泌物(GH、PLR等)等。

左图:MPO在小鼠骨髓中胞质阳性

右图:VIM在睾丸癌中胞质阳性

第四类:胞膜-质型表达

阳性颗粒分布于细胞质和细胞膜。常见的有肿瘤相关抗原(如CA家族抗原)、间皮标志物(MCA、CR等)等。

左图:EGFR在尿路上皮癌中胞膜-质阳性

右图:EPCAM在甲状腺癌中胞膜-质阳性

第五类:胞核-质型表达

阳性颗粒分布于细胞核和细胞质。常见的有S-100、HMB45、Melan A、HSP27、MLH1等。

左图:CCND1在乳腺癌中胞核-质阳性

右图:S100B在黑色素瘤中胞核-质阳性

以上我们将蛋白的不同定位类型做了一个讲解。那如何得知我们要研究的蛋白理论的表达部位呢?小编给大家推荐一个数据库- uniprot。

链接:https://www.uniprot.org

打开链接,在搜索栏输入想查询的蛋白名称,然后根据物种点开相应的数据链接,即可在Subcellular location这一栏找到该蛋白的理论细胞定位。

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