hepg2细胞培养方法？

来源：人源
组织：肝脏
细胞形态：上皮样细胞
培养属性：贴壁
癌症类型：肝癌
应用：这种细胞适合作为转染宿主

细胞产物：甲胎蛋白、白蛋白、α2巨球蛋白、α1抗胰蛋白酶、转铁蛋白、α1 抗凝乳蛋白酶、结合珠蛋白、血浆铜蓝蛋白、纤溶酶原、补体(C4)、C3活化因子、纤维蛋白原、α1酸性糖蛋白、胎球蛋白A、β脂蛋白、视黄醇结合蛋白

其他：
细胞有表达3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。
细胞在氧化应激反应中apoA-I mRNA表达降低，过氧化氢酶mRNA表达升高。

没有证据表明该细胞系中存在乙型肝炎病毒基因组。

完全生长培养基：该细胞系的基本培养基是Eagle's Minimum Essential medium。为了制作完整的生长培养基，在基础培养基中加入胎牛血清，最终浓度为10%。

传代培养：

75 cm2的细胞培养瓶。推荐使用康宁? T-75细胞培养瓶（目录号＃430641）。按比例增加或减少其他大小的培养容器所需的消化培养基的量。

移除并丢弃培养基。

用0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA溶液短暂冲洗细胞层，清除所有含有胰蛋白酶抑制剂的血清。

向培养瓶中加入2.0-3.0 mL的胰蛋白酶-EDTA溶液，并在倒置显微镜下观察细胞，直至细胞层分散（通常需要5至15min）。

注意：为避免结块，在等待细胞分离时，请勿通过敲击或摇动烧瓶来搅动细胞。可将难以分离的细胞置于37°C促进分散。

加入6.0-8.0 mL完全生长培养基，并轻轻吸取细胞。

将细胞悬液等分，分别添加到新的培养皿中。

37°C孵育。

传代培养比例：建议将继代培养比例设为1：4至1：6

中度更新：每周两次

冷冻保存：
    
冷冻培养基：完全生长培养基，添加5％（v / v）DMSO
储存温度：气相液氮

培养条件：
    
温度： 37°C
大气：空气，95％；二氧化碳（CO 2），5％