【2018-2期】This Week in Extracellular Vesicles

本周hzangs在最新文献中选取了8篇分享给大家，其中6篇提供中文摘要。另外还有2篇letter；第1篇文章介绍了运动引起的细胞外囊泡的变化和作用；第4篇介绍了使用流式细胞仪区分血液中细胞外囊泡和脂蛋白颗粒的新参数设置；第7篇是两篇letter，letter讨论的是间充质干细胞来源外泌体和心球样细胞团来源外泌体在心肌梗塞干预方面的异同及各自优势。相关文章的原文在周一前会发布到论坛同名贴下，需要的可以到论坛下载。

1.  Extracellular Vesicles Provide a Means for Tissue Crosstalk during Exercise. 细胞外囊泡为运动时组织间通讯提供了一种手段。 [Cell Metab] IF=18.16  PMID：29320704

摘要：运动能够刺激分子释放到循环中，这一发现支持了组织间信号蛋白作为重要的调节和适应运动的观点。考虑到许多循环蛋白是包装在细胞外囊泡（EVs）中的，我们采用定量蛋白质组学技术表征了运动诱导细胞外囊泡相关的蛋白质分泌。在健康人进行1小时的自行车运动之后，我们观察到超过300种蛋白质在循环系统中呈现增加的趋势，并且明显富集了几类构成外泌体和小细胞外囊泡的蛋白质类群。脉冲追踪和活体成像实验表明，通过运动释放的细胞外囊泡具有在肝脏中定位的倾向，并且可以转移它们的蛋白质成分到肝脏相关细胞。此外，通过采用动静脉平衡研究人肢体收缩过程，我们确定了几个新的候选肌动蛋白，这些肌动蛋白释放到循环系统的过程独立于经典的分泌方式。这些数据证明了运动过程中的组织间通讯可以发挥系统性的生物效应。

PS:在去年的周总结中介绍过一两篇关于运动过程改变人体循环系统中细胞外囊泡含量和成分的报道，感兴趣的可以去看一看。这篇文章是最近发表在cell metab上的介绍细胞外囊泡参与运动过程中组织间通讯的报道，文章是以人类受试者为研究对象，利用蛋白质组学分析了受试者运动前后循环系统中细胞外囊泡的变化以及器官倾向性，结果显示运动后大量的囊泡倾向于到肝脏。开年一篇大文章，做代谢的同学可以读读。

2.  Identification of Cardiomyocyte-Fated Progenitors from Human-Induced Pluripotent Stem Cells Marked with CD82.从CD82标记的人诱导多能干细胞鉴定心肌细胞的祖细胞。 [Cell Rep] IF=8.28  PMID：29320747

摘要：本文中，我们发现表达四跨膜蛋白家族糖蛋白CD82的人诱导多能干细胞（hiPSC）衍生的心肌细胞（CM） -心肌细胞定向的祖细胞（CFP）几乎在体外和体内仅分化成CMs。在hiPSC分化过程中，CD82在晚期中胚层细胞中瞬时表达。纯化的CD82 +细胞在体外含血清的非特异性培养条件下以及在体内移植到小鼠肾脏下或小鼠损伤的心脏中能够产生心肌细胞，表明CD82成功的标记CFP，可以作为心脏心肌细胞前体祖细胞的标志物。在中胚层细胞以及未分化的hiPSC中CD82过表达增加了含有β-连环蛋白的外泌体的分泌和核定位β-连环蛋白的水平，表明CD82通过Wnt信号传导的抑制参与对CM的命运决定。这项研究可能有助于了解CM分化机制和心脏再生策略。

PS：其实这篇文章主要在介绍CD82作为心肌细胞祖细胞的生物标志物。文中只在关注CD82下游时涉及到了外泌体，他们发现CD82的过表达会促进β-catenin阳性外泌体的比例。但是这一点却值得从事外泌体研究的朋友关注一下，CD82如何调控了β-catenin进入外泌体可能是一个值得关注的问题。

3.  Exosomes Expressing the Self-Antigens Myosin and Vimentin Play an Important Role in Syngeneic Cardiac Transplant Rejection Induced by Antibodies to Cardiac Myosin.表达自身抗原肌球蛋白和波形蛋白的外泌体在心肌肌球蛋白抗体诱导的同基因心脏移植排斥中发挥重要作用。 [Am J Transplant] IF=6.17  PMID：29316217

摘要：心脏移植的长期成功率受到体液和细胞介导的免疫应答的影响。我们研究了两种心脏自身抗原，肌球蛋白和波形蛋白以及抗自身抗原诱导的外泌体诱发心脏移植物免疫反应的抗体。在同种异体小鼠心脏移植后，在第0天或第7天施用兔抗肌球蛋白或正常兔免疫球蛋白。在心跳停止后收集血清并分析细胞浸润，同时从血清中分离外泌体。对照移植心脏的组织病理学显示正常结构，并且它们的血清既没有表现抗自身抗原的抗体，也没有表现出表达自身抗原的外泌体。在移植后（第0天）立即施用抗心肌肌球蛋白的抗体，但不在第7天触发移植失败，实验显示组织病理学的细胞浸润有嗜中性粒细胞和淋巴细胞。被拒绝的心脏组织病理学也显示出肌细胞损伤，并且血清增加了对肌球蛋白和波形蛋白的抗体，并且产生表达自身抗原的外泌体。从含有自身抗原的失败的移植物中分离的外泌体的施用能够诱导移植物功能障碍;从稳定小鼠分离的外泌体不会诱导移植失败。抗自身抗原的抗体可以诱导含有自身抗原的外泌体，启动免疫应答并在心脏移植后造成移植失败。

PS：前些天介绍过美国移植生物学大会上发表的一篇总论型的文章，介绍了移植生物学研究中热点，外泌体位列其中。这篇文章则是外泌体参与移植过程中免疫排斥调节的又一报道，感兴趣的可以读读。

4.  Absolute sizing and label-free identification of extracellular vesicles by flow cytometry. 不依赖于与特定额标记，用流式细胞仪检测细胞外囊泡。 [Nanomedicine] IF=4.73  PMID：29307842

摘要：血液含有细胞外囊泡（EVs），这是可以在临床应用的生物来源纳米级粒子。在血浆中，因为类似大小的脂蛋白颗粒（LP）的存在导致了检测结果中细胞外囊泡的数量的失常，产生了有争议的数据，如抗体与LP的非特异性结合等。流式细胞术是可以表征体液中单个EV的临床适用技术。在这里，我们提出一种新的方法，命名为流式细胞仪散射比率（Flow-SR），以将流式细胞术的模糊光散射信号与直径在200-500nm之间的单个纳米颗粒的直径和折射率（RI）联系起来。 使用Flow-SR参数可以不依赖特定蛋白标签情况下区分EV和LP。由于Flow-SR易于实施，适用范围广，且比现有技术更精确，更快速地分析悬浮液中的纳米颗粒大小，因此在纳米医学领域中Flow-SR有着广泛的应用。

PS：这是一篇介绍流式细胞仪新参数的文章。血清中有大量的颗粒，包括脂蛋白颗粒。在外泌体领域刚刚兴起时，由于一些不严谨数据的影响，使很多该领域的研究者都认为血清中有大量的细胞外囊泡。但随着目前研究的推进，大家逐渐认识到之前被认作是囊泡的纳米粒子其实更多的是脂蛋白颗粒，血清中的脂蛋白颗粒要比细胞外囊泡多很多，因此如何区分脂蛋白颗粒和细胞外囊泡就是一个比较重要的问题了。该文章为区分两者而专门提出了一个新的流式细胞仪参数，感兴趣的可以读读。

5.  Serum exosomes as predictors of clinical response to ipilimumab in metastatic melanoma. 血清外泌体作为临床对伊匹单抗在转移性黑素瘤中的反应的预测因子。 [Oncoimmunology] IF=7.2  PMID：29308314

摘要：免疫治疗在转移性黑素瘤（MM）中是有效的，但是大多数研究未能发现预测临床反应的生物标志物。MM患者的血清中可以检测到来自黑素瘤细胞的外泌体（Exo），类似的，控制肿瘤进展的免疫细胞产生的外泌体同样可以被检测到。在这里，我们通过流式细胞术研究了59名接受IPI治疗的MM患者T细胞和树突细胞（DC）来源的外泌体水平，同时检测了PD-1，CD28和ICOS以及CD80和CD86的相对表达。我们发现PFS和OS改善的患者群体表现出PD-1和CD28表达显着增加。此外，接受IPI的MM患者在治疗结束时在DC衍生的Exo上CD80和CD86的表达上升。这些结果提示免疫细胞来源的Exo上PDI-1和CD28可能与预示着患者对IPI更好的临床反应。

PS：依旧是一篇介绍外泌体生物标志物的报道，感兴趣的可以读一读。

6.  Novel Therapy for Glioblastoma Multiforme by Restoring LRRC4 in Tumor Cells: LRRC4 Inhibits Tumor-Infitrating Regulatory T Cells by Cytokine and Programmed Cell Death 1-Containing Exosomes.通过在肿瘤细胞中恢复LRRC4表达对多形性成胶质细胞瘤进行治疗：LRRC4通过细胞因子和含有程序性细胞死亡1因子的外泌体抑制肿瘤浸润调节性T细胞。 [Front Immunol] IF=6.43  PMID：29312296

摘要：多形性成胶质细胞瘤（GBM）是一种异质性的恶性脑肿瘤，其病理性发病诱导了肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）的积聚。作为肿瘤抑制基因，LRRC4不再GBM细胞中表达。在这里，我们发现在GBM细胞中恢复LRRC4的表达抑制了肿瘤浸润调节性T细胞（Ti-Treg）的浸润，促进了肿瘤浸润效应T（Ti-Teff）细胞和CD4 + CCR4 + T细胞的扩增，并增强了GBM免疫微环境中CD4 + CCR4 + T细胞的趋化性。 LRRC4不能通过外泌体从GBM细胞转移到TIL中，而是通过释放细胞因子直接促进Ti-Trge细胞的扩增发挥其抑制作用，同时GBM细胞衍生的外泌体（无细胞因子和含有程序性细胞死亡1因子）也有助于调节Ti-Treg，Ti-Teff和CD4 + CCR4 + T细胞上的LRRC4。在GBM细胞中，LRRC4直接与磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1（PDPK1）结合，磷酸化IKKβser181，促进NF-κB活化，促进白细胞介素-6（IL-6），CCL2和干扰素γ的分泌。另外，需要HSP90来维持LRRC4和PDPK1之间的相互作用。LRRC4抑制Ti-Treg细胞扩增和促进CD4 + CCR4 + T细胞趋化性可分别被抗IL-6抗体或抗CCL2抗体所阻断。 另一方面，miR-101是GBM中的抑制基因。我们以前的研究表明EZH2，EED和DNMT3A是miR-101的直接靶点。在这里，我们研究发现miR-101能够逆转LRRC4启动子的高甲基化，并通过直接靶向EZH2，EED和DNMT3A诱导GBM细胞中LRRC4的重新表达。我们的研究结果揭示了GBM微环境调控的一种新的机制，并提供了一种新的治疗策略。

PS：这是一篇有点偏向于肿瘤免疫治疗的报道，文章介绍了含有PDCD1的外泌体在抑制肿瘤过程中的作用。

7.  Letter by Chen and Shen Regarding Article, "Exosomal MicroRNA Transfer Into Macrophages Mediates Cellular Postconditioning"。 [Circulation] IF=19.31  PMID：29311353

Response by Marbán and de Couto to Letter Regarding Article, "Exosomal MicroRNA Transfer Into Macrophages Mediates Cellular Postconditioning"。[Circulation] IF=19.31  PMID：29311354

PS：如何优雅的争论？苏州大学的老师做了一个示范，同时将letter发到了近20分的杂志上。但是洛杉矶的朋友回复却有点外强中干。 两篇letter讨论了心肌梗塞中间充质干细胞来源的外泌体是否影响巨噬细胞的浸润和极化，间充质干细胞来源外泌体对巨噬细胞极化是不是有更强的调控作用，以及可能依赖的通路。苏州大学的老师提问，洛杉矶的朋友回答。洛杉矶的朋友从数据出发认为间充质细胞来源的外泌体与他们所研究的心球样细胞团来源外泌体可能具有着不同的功能，同时强调了后者在以往的报道中认为是更好的干预心梗的选项。到底是心球样细胞团来源外泌体更好一些，还是间充质干细胞来源的外泌体更好一些；这个应该是仁者见仁，智者见智的事情。苏大老师问题问的很优雅，同时看完这篇letter也能了解不少MSC来源外泌体对心肌梗塞干预的效果和机制，洛杉矶的朋友也做了一个很标准的答复。读一读，相信大家可以有所收获。让你明白什么样的letter可以在20分的杂志上发表。

8.  Exosomes associated with human ovarian tumors harbor a reversible checkpoint of T cell responses. 与人类卵巢肿瘤相关的外泌体具有可逆的T细胞应答检查点。 [Cancer Immunol Res ] IF=8.28  PMID：29301753

PS：文章报道了卵巢癌患者腹水中来源的外泌体对T细胞激活有可逆的抑制作用。

9.  Changes in V-ATPase subunits of human urinary exosomes reflect the renal response to acute acid/alkali loading and the defects in distal renal tubular acidosis. 人尿液外泌体的V-ATP酶亚基的变化反映了肾脏对急性酸/碱负荷的反应以及远端肾小管酸中毒。 [Kidney Int] IF=8.40  PMID：29310826

PS：一篇外泌体生物标志物的报道文章，介绍了尿液外泌体中V-ATP酶亚基变化对疾病的预测功能。

10.  Microglia-derived extracellular vesicles in Alzheimer's Disease: a double-edged sword.阿尔兹海默症患者小胶质细胞来源的细胞外囊泡 ：一把双刃剑。 [Biochem Pharmacol] IF= 4.58 PMID：29305855

PS：一篇综述，特定情况下细胞外囊泡的双面性，相关领域的朋友可以关注一下。

今天的整理就到这里。希望大家可以有所收获。大家下周见！

编辑：土豆

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