Transwell侵袭实验注意事项

1、细胞接种剂量不同的细胞，其侵袭能力是不同的，细胞量过多，穿过膜的细胞会过多过快，最后会难以统计结果;而细胞量过少，可能还没到检测的时间点，所有的细胞都已穿过，进入下室。因此最少也要保证在收样的时候，上室内还要有一定量的细胞存在。

　　几种常见细胞的每孔接种数量如下表：(个人经验，不同实验室可能略有差异)

　　2、避免产生气泡下层培养液和小室间常会有气泡产生，一旦产生气泡，下层培养液的趋化作用就减弱甚至消失了，将小室放入培养板时要注意，如有气泡产生，须将小室提起，去除气泡，再将小室放进培养板。

　　3、检测时间点培养时间主要依癌细胞侵袭能力而定，时间点的选择除了要考虑到细胞、细胞侵袭力及处理因素等。

　　4、注意事项用棉签擦掉上室细胞时注意不要蹭到已穿膜的那一层细胞。

　　5、对于比较难穿膜的细胞，可以在实验开展前撤掉血清节饥饿处理12h-24h。