猪场猪只血液采集与样品运输

猪场疫病与抗体监测是掌握猪群疾病发生、流行、净化重要工具，检测样品的质量是进行样品检测前提，血清质量直接影响着检测结果的准确性。因此，如何获得符合实验室检测要求、高质量的样品是进行检测的第一步，本文就猪只血液采集与样品运输进行简单阐述。

1.猪的血液循环系统

猪的采血部位有前腔静脉、桡头静脉、耳静脉等。目前，大多数使用耳静脉采血，该方法存在很多缺点，费时、易失败、血样易被污染；猪前腔静脉采血是一种适用的采血方法，但能熟练运用这种方法的并不是很多。

2.血液组成

血液包括血浆和血细胞，血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。我们平时用做ELISA检测的血清是指血液凝固后，在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。

3.样品采集

3.1准备工作

物品准备：采样箱、一次性注射器（规格下述）、75%酒精棉球、5ml真空采血管（无/有抗凝剂，按检测需要选择）、登记表等。

人员准备：2-3人。

3.2前腔静脉采血（30kg以下）

猪只采取仰卧保定方式。前肢摊开，于胸骨突处形成的四个凹陷，选择前面的凹陷处，酒精棉球消毒后，持注射器（10-30kg小猪，选择9号针头，10kg以下仔猪，选择7号针头），回抽针筒，由上而下，稍偏向中央及胸腔方向入，见有回血，即可采血，一般采集3-4mL，采血完毕，拿酒精棉球紧压针孔处，迅速拔出采血针管，为防止出血，针孔处应按压片刻。

3.3颈静脉采血（30kg以上）

猪用绳子或套口固定上颌，上提保定，尽可能抬得高些，使猪的头颈与水平面呈30°以上，身体平直，前肢伸向后方，在胸腔入口前下方两侧的凹陷处向心脏位置的胸腔方向进针，边进针边抽吸，当有大量血液进入针管时，说明刺中了前腔静脉，此时停止进针，采到足量血样。采用前腔静脉采血，应选择颈右侧为宜，不宜刺到神经，安全性高。

3.4耳缘静脉采血

该方法由于血管细、血量少且血流速度非常慢，采血速度较慢，操作不熟练容易导致溶血。方法为猪站立保定，助手用力在耳根捏压静脉的近心端，手指轻弹后，用酒精棉球反复涂擦耳静脉使血管怒张，针头朝着耳尖方向沿着血管刺入，缓慢抽取所需血液量。用干棉球或棉签按压止血。

4.血液样品处理

血液成功采出后，要将其立即推入采血管/离心管中（按要求选择采血管），防止注射器内凝血。针头紧贴管壁缓慢注入，防止损坏血细胞，造成溶血，使血清不能分离出来，标明猪只的耳牌号。

5.样品处理

血液样品应置于2-8℃低温环境中冷藏保存，严禁冷冻，需冷藏过夜，待血清析出后，将血清分离，-20℃保存（有条件的情况下，可进行离心处理后，分离血清）。若需抗凝全血，在注射器或试管内需预先加入抗凝剂或选择合适的抗凝管。

6.样品运输

样品（血清/全血）放入泡沫保温箱中运输，根据季节温度情况和运输时间长短放入足够冰袋。做检测需要附带猪场、免疫背景等详细信息。

通过对猪群进行抗体水平检测，及时了解和跟踪猪群抗体水平，从而制定和调整免疫程序，对指导生产、控制疫病起着至关重要的作用。

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