慢病毒包装特点、应用及流程

慢病毒（Lentivirus） 载体是以HIV-1（人类免疫缺陷I型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体。作为快速有效的遗传物质投递工具，慢病毒的应用在生物医疗研究领域已广泛流行。

慢病毒特点：

1、区别一般的逆转录病毒载体，它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力，常用于感染难转染的细胞，如原代细胞、神经元细胞、干细胞、不分化细胞、心肌细胞、肝细胞、内皮细胞、肿瘤细胞，且效率近100%

2、可装载DNA片段容量高达8kb

3、目的基因进入到宿主细胞之后，经过反转录，整合到基因组，形成稳定遗传物质，使得目的基因在细胞中可稳定长期表达。

4、病毒载体颗粒通过包装元件和含病毒基因组质粒共转染包装细胞系。利用逆转录机制构建自我失活(SIV)的HIV-1来源的载体,一旦转移到靶细胞后,它就丧失了病毒长末端重复的转录能力,减少了产生重组病毒的机会,并避免了与启动子干扰的问题。

综上特点决定了其应用：

1、用慢病毒载体携带目的基因比用质粒瞬时转染更适于稳转株构建。

2、载体带有可进行高效率的包装、转染并稳定整合进靶细胞的基因组中的序列元件，其产生滴度更高，为活体动物模型实验提供高性价比的包含目的基因的病毒液。

3、其高转导效率及整合到基因组的特点为RNAi和cDNA 克隆以及报告基因的研究提供了一个有利的途径。

慢病毒包装流程：

l 制备DNA/转染试剂复合物

l 转染工具细胞：通常使用293T细胞

l 收获病毒

l 去除蛋白等杂质

l 检测滴度