细胞状态不好,养不起来,怎么办?
策略 1:一般情况下,从血清下手就行,要么换好血清,要么提高血清浓度,血清浓度提高到 15%~20% 培养 48 h,换成正常 10% 的浓度,用高浓度的血清培养时间过长对细胞有毒性。
策略 2:血清下手之后可以同时采取提高细胞密度的方法,从培养瓶换到六孔板,12 孔板等,细胞密度大,细胞分泌的细胞因子多,肿瘤细胞通过旁分泌途径促进细胞生长。
预防策略:细胞胞质疏松,老化的原因在于细胞传代次数比较多,胰酶消化时间太长,这时候,一定要控制细胞传代次数,注意胰酶消化时间,胰酶消化时间过长,容易导致细胞状态不佳以及胞质疏松。有一招,元元没试过,可以尝试,将细胞冻起来,过段时间复苏,细胞会长得比较好。
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