Frdbio® Strep-tag II标签蛋白纯化试剂盒

Frdbio® Strep-tag II标签蛋白纯化试剂盒用于纯化各种表达系统中含有Strep-tagII或者TwinStrep-tagII标签的重组蛋白，包括大肠杆菌表达系统、哺乳动物表达系统、酵母表达系统等等;本试剂盒配备了纯化蛋白所必需预装柱及核心试剂。本试剂盒中预装柱的填料为Streptactin Beads 4FF。偶联到填料的蛋白配基为改良Streptactin蛋白，主要优势如下：本蛋白纯化试剂特点：Ø  Strep-tagII/TwinStrep-tagII这两个标签标小，并且对蛋白结构没有影响；Ø  Strep-tagII/TwinStrep-tagII标签与Streptactin亲和力高，非6*His、GST之辈可比；Ø  Streptactin Beads这个纯化可以耐受变性剂，在高浓度尿素和盐酸胍里仍然可以轻松挂柱，纯化包涵体不是障碍；Ø  生物素可以轻松洗脱，不需要昂贵的脱硫生物素；Ø  洗脱条件温和，不会对蛋白造成造成损伤；Ø  填料再生简单，反复使用，实验室测试表明再生15次后，Streptactin Beads填料效率没有明显降低。产品主要参数：基质：交联度4%琼脂糖凝胶配体：改良Streptactin蛋白载量：4mg Twin Strep-tagII蛋白/ml基质介质微球粒径：45-165um最大流速：300cm/h

试剂盒已经提供材料：产品编号预装柱浓缩基础缓冲液（10X）浓缩洗脱缓冲液(10X)浓缩再生缓冲液（10X）PPR0022k-2*1mL1mL*230ml15ml15mlPPR0022k-5mL5mL30ml*230ml30ml其他需要自备试剂材料：²  待纯化蛋白样品；²  移液器及吸头；²  去离子水；²  0.22μm或0.45μm滤膜过滤。产品储存储存缓冲液：含20%乙醇的1×PBS储存温度：2-8℃产品使用操作：1.使用前准备1）缓冲液的准备基础缓冲液:按照实验所用量，取试剂盒中浓缩基础缓冲液，加入9倍体积的去离子水稀释成基础缓冲液；洗脱液:按照实验所需用量，取试剂盒中浓缩洗脱液，加入9倍体积的去离子水稀释成洗脱液；再生液:按照实验所需用量，取试剂盒中浓缩再生液，加入9倍体积的去离子水稀释成再生液；缓冲液在使用之前建议用0.22μm或0.45μm滤膜过滤。2）样品准备样品使用上述基础缓冲液制备上样样品（细胞/细菌裂解液），样品在上样前用0.22μm或0.45μm滤膜过滤，防止堵塞柱子。3）Frdbio® Streptactin Beads 4FF纯化柱的准备取出试剂盒中预装柱平衡到室温，打开纯化柱底部开关，用3-5个体积去离子水冲洗柱床，随后用5-10个柱床体积基础缓冲液平衡柱子，确保柱床无气泡。2.从样品中纯化目标蛋白1）使用蠕动泵上样或者直接上样（重力法）；上样量不要超过柱子的结合能力。2）上样完毕后，用基础缓冲液洗掉未结合的杂蛋白，直到到紫外吸收监测仪达到一个稳定的基线（一般需要10-15个柱体积）；3）使用洗脱液洗脱目的蛋白，顺次接收并做好标记，直到到紫外吸收监测仪达到一个稳定的基线（一般需要5-10个柱体积）；4）SDS-PAGE检测分析得到的纯化样品（包括流穿组分、洗杂组分和洗脱组分）以及原始样品。3.纯化柱清洗、再生与保存。1）5-10倍柱床体积的洗脱缓冲液继续清洗；2）3倍柱床体积的去离子水清洗；3）5-10倍柱床体积的0.1M NaOH溶液；4）3倍柱床体积去离子水清洗后于含20%乙醇的PBS 2-8℃保存。