供应海肾荧光素酶(Rluc)/Gaussia荧光素酶(Gluc)的荧光发光底物
海肾荧光素酶( renilla luciferase,Rluc)是一种真核表达的荧光素酶,具有特异性底物腔肠素( coelenterazine ),Rluc的信号分子活性在腹腔注射底物coelenterazine 1 min内达到高峰。Rluc敏感性高、代谢速度快,可用于标记肿瘤细胞。本研究采用Rluc标记肝癌细胞,利用活体成像进行系统直观、定量监测肿瘤细胞在小鼠体内的生长、转移情况。
腔肠素h(Coelenterazine h),天然腔肠素的去羟基衍生物,是海肾荧光素酶(Rluc)和Gaussia荧光素酶(Gluc)等多种荧光素酶的作用底物,也是水母发光蛋白的辅因子,其发光强度比天然腔肠素高10倍以上,适用于报告基因分析。也是水母发光蛋白的辅助因子,可用于检测活细胞中钙离子浓度,基因报告分析,BRET(生物发光共振能量转移)研究,ELISA,HTS,以及组织或细胞中ROS水平的化学发光检测。
腔肠素是在水生生物中发现的一种发光基团,是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶,分泌型膜锚定荧光素酶和薮枝虫荧光素酶,和发光蛋白包括水母发光蛋白的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm(见下图)。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。
腔肠素h(from Caliper LifeScience Inc.)
RediJectCoelenterazineh为即用的注射型生物发光底物,特别设计用于体内成像研究。通过最小化产品成分的变化,
优 点:
(1)预制配方,不同批次间严格控制特别设计用于体内研究;
(2)即用型产品通过最小化预成像准备步骤,减少时间和精力;
(3)每瓶可用于5只动物的成像研究;(10 瓶/kit)
(4)经IVIS成像系统验证,控制体内成像质量;
颜色:黄色溶液(溶于丙二醇/柠檬酸盐)
浓度:150 μg/mL (10瓶无菌溶液,每瓶含1.2 mL浓度为150 μg/mL的Coelenterazine h )
保存: Store at ≤ -70 °C。
使用及注射剂量:
开始实验前,37 °C水浴锅解冻,避免重复冻融。静脉注射(i.v.)或腹腔注射(i.p.)。
1.静脉注射:推荐使用剂量15 μg/mouse(100 μL/mouse),用1 ml注射器直接从瓶内吸取溶液,然后用25 gauge或更高的针头注射入小鼠体内。尽快成像检测以获得峰值信号。
2.腹腔注射:推荐剂量是30 μg/mouse (200 μL/mouse),方法同上。
应用实例:
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Coelenterazine h 腔肠素h
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zzj 2021.3.8