基因工程小鼠拿到后,如何设计繁育策略?

(1) 转基因小鼠

转基因阳性小鼠与野生型小鼠交配:TG × WT

(2)基因敲除/敲入

杂合子与杂合子交配,获得纯合子:+/- × +/- → -/-

对于ES细胞打靶途径获得的小鼠:

对于CRISPR/Cas9途径获得的小鼠:

(3)条件性基因敲除

获得 flox 纯合同时 Cre 阳性的小鼠:(f/+;Cre-)×(f/+;Cre+)→f/f;Cre+

这样最终可以获得 1/8的 flox 纯合且带有 Cre 的条件性基因敲除小鼠(f/f;Cre+)。如果觉得效率过低,也可以在繁育 f/+;Cre+ 的同时,繁育 flox 纯合子(f/f),再将这两种小鼠相互交配。这样,就可以获得 1/4 的 f/f;Cre+ 敲除小鼠啦。

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