基因工程小鼠拿到后,如何设计繁育策略?
(1) 转基因小鼠
转基因阳性小鼠与野生型小鼠交配:TG × WT
(2)基因敲除/敲入
杂合子与杂合子交配,获得纯合子:+/- × +/- → -/-
对于ES细胞打靶途径获得的小鼠:
对于CRISPR/Cas9途径获得的小鼠:
(3)条件性基因敲除
获得 flox 纯合同时 Cre 阳性的小鼠:(f/+;Cre-)×(f/+;Cre+)→f/f;Cre+
这样最终可以获得 1/8的 flox 纯合且带有 Cre 的条件性基因敲除小鼠(f/f;Cre+)。如果觉得效率过低,也可以在繁育 f/+;Cre+ 的同时,繁育 flox 纯合子(f/f),再将这两种小鼠相互交配。这样,就可以获得 1/4 的 f/f;Cre+ 敲除小鼠啦。
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