RNAi转基因大鼠构建技术原理

与小鼠相比，大鼠体型较大，其生理学特征易于研究，是多种人类疾病的重要模式动物。

大鼠是研究生理学的理想模型，研究者已经得到了大量的纯系大鼠，并且在大鼠的行为、细胞、生理、生化、药理和毒理学方面积累了大量的数据；大鼠还是研究人类高血压、糖尿病、乳腺癌和神经系统疾病的理想动物模型。大鼠在形成乳腺癌等肿瘤时的激素反应和人非常相似。从某种程度上说，大鼠是目前最适合的人类疾病动物模型之一，是可以将基因组和功能结合起来的动物模型。

大鼠同时也是药理学研究的首选动物，并且被广泛应用于心血管疾病、运动疾病的研究领域。大鼠可以用来模拟几乎所有已知的人类疾病，了解大鼠的遗传结构将帮助研究人员发现与疾病相关的基因，从而更加清楚地认识基因以及环境对人类的健康造成的影响。大鼠一直广泛应用于药物的效力以及安全性测试工作，对大鼠基因组序列的了解，将为药物干涉提供新的目标，这将对新药的研制产生巨大的推动作用。

制作转基因大鼠最常用的一种方法是DNA原核显微注射。DNA原核显微注射是指将外源DNA通过显微注射的方法注射到受精卵的原核内，注射DNA整合到大鼠受精卵的基因组中，并稳定遗传给后代。 使用PiggyBac系统DNA显微注射，制备的转基因鼠基因表达阳性率为常规质粒DNA显微注射的2倍以上！

RNAi转基因大鼠

通常采用U6/H1驱动shRNA表达，设计靶序列构建shRNA载体，利用原核显微注射的方法将shRNA载体注射到受精卵中。在基因表达的过程中，通过shRNAi的干扰作用，达到对目的基因表达的沉默抑制，实现基因功能的研究。