生物缓冲剂TAPS的合成工艺
TAPS,全称N-三(羟甲基)甲基-3-氨基丙磺酸,是一种两性离子缓冲剂,广泛应用于生物化学和分子生物学领域。它是Tris系列缓冲液的一部分,pH缓冲范围7.7-9.1,溶于水(25g/50ml)。TAPS作为DNA筛分体系中常用的缓冲液体系,也可作为RNA样品的缓冲液成分,适用于叶绿体薄层备样的电子传递和磷酸化研究,在冷冻干燥过程中保护氧合血红蛋白氧化为高铁血红蛋白,也可作为毛细管区带电泳进行蛋白微量分析的背景电解质。中文名N-三(羟甲基)甲基-3-氨基丙磺酸分子量243.28TAPS的化学结构
简称TAPS分子式C7H17NO6SCAS#29915-38-6存储条件室温,避光防潮熔点230-235℃颜色白色目前,有关TAPS的合成工艺报道很少,国内陈桂娥等人详细研究了TAPS的合成方法。他们以三羟甲基氨基甲烷(Tris)和1,3-丙磺酸内酯(1,3-PS)为原料,使其在醇类溶剂中反应,操作流程如下:1. 称取等摩尔量的Tris和1,3-PS,并取适量醇类溶剂放入250ml带有冷凝回流的三口烧瓶中,搅拌情况下,加热升温并回流;2. 待反应一段时间后,停止反应;在室温下,将反应后的溶液静置冷却至室温后,减压抽滤,TAPS粗滤饼用适量的无水乙醇洗涤2~3次,取出TAPS滤饼,放入真空干燥箱烘干,减压抽滤的滤液回收待用。主要反应式如下:
在上述合成过程中,反应时间、不同的醇溶剂及反应溶剂的循环利用对TAPS收率和纯度均有一定程度影响。实验结果表明,反应时间控制在6小时,收率最高,达到70.3%,继续延长反应时间,收率略微下降;对于考察的乙醇、正丙醇、异丙醇和正丁醇反应溶剂,正丁醇作为反应溶剂的TAPS收率和纯度最高,分别为70.3%和94.36%;在反应过程中,反应溶剂的循环利用有利于提升TAPS的收率和纯度。综上所述,采用Tris和1,3-PS为原料合成TAPS,反应时间控制在6小时,采用正丁醇作为溶剂,且在反应过程循环利用,得到的TAPS的收率和纯度最佳。