组织芯片的制备步骤

根据制作方法，可以分为石蜡包埋的组织芯片和冰冻芯片两种。肿瘤中常用的是石蜡包埋的组织芯片，通过组织芯片制作机细针打孔的方法，从众多的组织蜡块(称为供体蜡块)中采集到数十至上百的圆柱形小组织(组织芯)，并将其整齐排列另一空白蜡块(称为受体蜡块)中，而制成组织芯片蜡块。然后对组织芯片蜡块进行切片，再将切片转移到载玻片上制成组织芯片。
　　其制作步骤如下:

　　制作模具蜡块，大小为45mm×20mm，在模具蜡块上打出间距为0.1 mm、直径为0.6 mm 的小孔，每个小孔以坐标准确定位;

　　样本蜡块根据HE染色观察，对石蜡标本中有代表性的点进行标记，包括典型的肿瘤和相应的正常组织，选定并分别在HE切片和相应石蜡组织块上标记取样组织的位点，用内径0.6 mm 的不锈钢针进行穿刺，深度2～3mm，将其固定于模具蜡块的小孔内;

　　切片前，蜡块需在4℃中预冷4h左右，然后夹在切片机上进行修正，等修到全部组织完整为止。用-20℃预冷冰袋贴在蜡块上5-10min左右，快速连续切片30-50张左右，再用冰袋冷冻组织块。

　　将模具蜡块以4μm厚度切片，敷贴于载玻片或尼龙膜等固相载体上，就制成了组织芯片。

　　图：组织芯片制备流程示意图