消毒剂对真菌的杀灭作用
陈昭斌1
, 张朝武2
(1. 深圳市南山区卫生防疫站, 广东 深圳 518054; 2. 四川大学医学院公共卫生学院, 四川 成都 610041)
关键词: 真菌; 消毒剂; 消毒; 灭菌; 医院感染
中图分类号: R187 文献标识码: A 文章编号: 100524529 (2001) 0420318203
1 真菌的生物学性状
真菌(fungus)是一种真核微生物。细胞结构比较完整,
有细胞壁和完整的核, 不含叶绿素, 无根、茎、叶的分化。为单
细胞或多细胞, 由丝状体和孢子组成。真菌种类 10 余万种,
大多对人体无害。真菌比细菌大几倍到几十倍, 有一层坚硬
的细胞壁, 但其不含有肽聚糖, 真菌的胞壁一般由 4 层组成,
最外层是糖苷类、第二层是糖蛋白, 第三层是蛋白质, 第四层
是几丁质的微原纤维。真菌以无性或有性方式繁殖。营养要
求不高, 在一般细菌培养基上能生长。培养真菌的最适pH
值为 4. 0～ 6. 0, 最适温度为 22～ 28℃。真菌生长缓慢, 常需
要培养 1～ 4 周。真菌对干燥、阳光、紫外线及一般消毒剂有
较强的抵抗力, 但不耐热, 60℃ 1 h, 菌丝与孢子均被杀死。
对抗细菌感染的抗生素不敏感1
。
2 真菌感染
真菌病(myco sis)是由真菌引起的感染性疾病。据文献
报道, 可引起人类疾病的致病真菌及条件致病真菌有 287
种2
, 引起人类疾病的真菌包括致病、条件致病、产毒以及致
癌的真菌1
。W enbergei等指出在医院感染经临床证实的感
染病例中细菌感染占 67% , 真菌感染占 23% , 病毒感染占
7% ,寄生虫感染占3%。R ichardson 指出医院真菌感染是近
年医院患者发病和死亡的重要原因, 仅就念珠菌病和曲霉病
为例1980 ～ 1990 年发病率增加了300% , 1984年, 美国CDC
医院感染监测网对美国 51 所医院的医院感染率做了监测,
在 26 965名感染者中, 有 84%分离出了病原菌, 其中假丝酵
母属和其他真菌, 包括曲霉属、枝孢属、隐酵母属等占所有检
出病原菌的 7. 2%。真菌感染部位以呼吸道感染最高, 其次
为胃肠道、泌尿道。真菌感染随住院院时间延长而呈上升趋
势2
。
3 常用消毒剂对真菌的杀灭作用
3 . 1 醇类 65%～ 80%乙醇作用 1～ 5 m in 可杀灭真菌孢
子3
。 Loew enthal(1961)用70%乙醇处理头发上奥杜安小孢
子菌, 1～ 2 m in 可使 40%头发达到抑菌, 若要达到全部抑菌
作用至少要1 h。 70%乙醇(体积ö 体积)是最适合杀灭新型隐
球菌、皮炎芽生菌、粗球孢子菌和荧膜组织胞浆菌。L uth i
(1954)认为 70%～ 96% (体积ö 体积)乙醇浓度是杀死真菌
收稿日期: 2000204202 ; 修订日期: 2001203215
孢子最有效浓度, 此外, 苯甲醇对真菌也具有杀菌作用4
。乙
醇抑制和杀灭真菌作用以 90%乙醇效果最好, 亦有一些研
究表明, 杀灭组织内的新型隐球菌、皮炎芽生菌、粗球孢子菌
和荚膜组织胞浆菌, 以 70%乙醇效果最强5
。乙醇杀灭真菌
孢子, 需 50%～ 80%溶液作用30～ 60 m in 6
。
3 . 2 酚类 22苯酚特别对真菌有效。它的钠盐抑菌能力极
强,抑菌浓度(Lgö m l)对黑曲霉为4, 对指间发癣菌为8。 2, 4,
62三氯酚, 22苄基242氯酚、二氯酚具有杀灭真菌的作用。 2, 4,
4′ 2三氯22′ 2羟基二苯醚三氯生( t r iclo san) 1～ 30 Lgö m l 可抑
制真菌, 2, 2′ 2二羟基25, 5′ 2二氯二苯硫化物芬替克洛
(fent ich lo r)主要用于皮癣菌的治疗, 它是有效的杀真菌剂之
一4
。一般来讲, 酚类化合物随着分子量加大, 对金葡菌、白
色念珠菌和结核杆菌的杀灭作用逐渐加强5
。苯酚杀真菌孢
子,需1%～ 3%溶液作用8～ 10m in。邻甲苯酚、对氯苯酚和
对氯邻甲苯酚对白色念珠菌的杀灭作用均比苯酚强, 其酚系
数分别为2. 0, 4. 0 及 11. 16
。
3 . 3 含氯制剂 对真菌, 如黑曲霉, 有效氯 100 ppm 在
pH10～ 11, 20℃, 作用 30～ 60m in, 可 100%杀灭。二氯异氰
脲酸钠(优氯净)能有效杀死一切微生物, 包括细菌、结核杆
菌、真菌、芽胞和病毒4
。0. 01%有效氯的次氯酸钠溶液可于
30～ 60 m in 内杀灭黑曲霉6
。Rutala 和W eber (1997)指出,
次氯酸盐对绝大部分微生物是致死性的, 尽管病毒和细菌繁
殖比细菌芽胞、真菌和原虫敏感7
,Ballereau 等(1997)指出,
含 0. 5% (Wö V )有效氯的次氯酸溶液能有效杀灭细菌、真菌
和病毒8
。
3 . 4 含碘制剂 10 000 ppm (1% )有效碘对白色念珠菌作
用 5 m in 的杀灭率为 99. 99%以上, 20～ 50 ppm 有效碘对石
膏状癣菌、光滑球拟酵母菌、白色念珠菌、新型隐球菌等真菌
有抑菌作用5
。1%有效碘的碘伏, 可于1 m in 内杀灭白色念
珠菌和新生隐球菌6
。
3 . 5 醛类 甲醛, 其水溶液称为福尔马林(Fo rmalin) , 是
历史上最早使用的一种气体消毒剂。至本世纪 20 年代已广
泛应用于医学灭菌, 被誉为第一代化学灭菌剂。 5%甲醛水溶
液,作用10m in, 可杀灭一般致病性真菌5
。甲醛杀灭真菌孢
子,需10%溶液作用8～ 10m in 6
。戊二醛, 是一种良好的灭
菌剂, 被誉为继甲醛和环氧乙烷之后, 化学灭菌剂发展史上
第三个里程碑5
。用2%碱性戊二醛或强化酸性戊二醛均可
杀灭一般真菌, 作用时间视菌种而异, 一般需 5～ 30 m in。
A kamatsu 等(1997)研究指出, 3. 2%碱性戊二醛对 20 种微
生物, 包括细菌繁殖体、细菌芽胞、分支杆菌和真菌的抗微生
· 813 · Ch in J No socom io lVo l . 11 No. 4 2001物活性比 2%戊二醛强, 10%～ 30%人血清未表现出影响戊
二醛的作用9
。吴立成(1993)报道, 2%戊二醛作用1m in, 对
白色念珠菌、新型隐球菌、断发毛癣、絮状表皮癣菌、石膏样
毛癣菌、大小孢子菌和红色毛癣菌的杀灭率达 95%以上10
。
3 . 6 强氧化消毒剂类
3 . 6 . 1 过氧乙酸 Koch 等(1967)用过氧乙酸对 4 种皮肤
癣菌和 6 种酵母菌进行试验, 0. 005%过氧乙酸能杀死上述
真菌和酵母菌, 比其他杀真菌的消毒剂强 400～ 1 600 倍4
。
浓度为 100～ 200 mgö L 时, 1～ 3 m in 即可杀灭须发癣菌, 浓
度为30～ 50mgö L 时, 5～ 10 m in 也可杀灭该菌, 浓度为100
～ 200mgö L 时, 0. 5m in 即可杀灭红色发癣菌、疣状毛菌, 时
间延长至1～ 2m in, 则可杀灭白色念珠菌、热带念珠菌, 浓度
为 100～ 2 000 mgö L 时, 0. 5～ 1 m in 可杀灭秃发副念珠
菌5
。过氧乙酸杀灭铁锈色发癣菌、石膏样孢子菌、白色念珠
菌及克氏念珠菌等, 仅需0. 01% 溶液作用0. 5～ 3m in或
0. 005%溶液作用 0. 1～ 5 m in; 对柏油板上的粗球孢子菌和
新生隐球菌的杀灭, 亦仅需0. 5%溶液作用5m in 6
。霍云燕
等(1993)报道, 过氧乙酸(3 gö m 3
)熏蒸 2 h, 可全部杀灭点种
于沙氏琼脂平板上的 44 株黄曲霉11
。何坚等(1997)也报
道, 在病房用 0. 5%过氧乙酸溶液喷雾(30 m lö m3
) , 密闭 30
m in, 空气中真菌的消亡率为 66. 9%～ 93. 5% 12
。王彩萍等
(1998)报道, 0. 2%过氧乙酸按 1 000 m lö m2
用量拖地后, 密
闭熏蒸 0. 5 h, 可将真菌由 472 CFUö m 3
减至 0 CFUö m3 13
。
3 . 6 . 2 臭氧 是一种强氧化剂, 其杀菌速度比氯快 300～
600 倍。伍学州等(1990)测定了臭氧对真菌的杀灭作用, 臭
氧消毒器开启30m in 后, 对青霉素杀灭率为93. 8% ,对毛霉
菌的杀灭率为 100% 14
。
3 . 6 . 3 二氧化氯 是英国科学家Humphney Dvay 1811
年发现的。是一种广谱、高效、速效的灭菌剂。用500 ppm 二
氧化氯, 作用 5 m in, 可 100%杀灭须发癣菌; 用 200 ppm , 作
用 60 m in, 对用 0. 03%小牛血清保护的烟曲霉菌的杀灭率
为 99. 9999%; 用 100 ppm 作用 60 s, 对用 0. 03%小牛血清
保护的白色念珠菌的杀灭率为 99. 99999% 5
; 刘育京等
( 1 9 9 2 ) 报道, 对白色念珠菌用2 5 0ppm 氧氯灵, 作用
10 m in, 杀灭率为 99. 99% , 对石羔样小孢子菌, 用 1 000
ppm 氧氯灵, 作用 5 m in, 杀灭率可达 100% , 对黑曲霉, 杀灭
率可达 99. 99% 15
。
3 . 6 . 4 过氧化氢 又名双氧水。是一种过氧化物灭菌剂。
3%过氧化氢溶液杀灭 90%白色念珠菌和黑曲霉, 约需作用
4 ～ 18 m in
6
。俞晓峰(1987, 1988, 1989)等报道, 白色念珠菌
受过氧化氢作用后, 扫描电镜观察, 到表面出现萎缩和凹陷,
甚至小孔, 或完全丧失细胞形态。用透射电镜观察到细胞失
去完整结构, 电子疏密层出现电子致密颗粒, 细胞膜消失, 胞
浆内容物混乱, 有内容物流出。白色念珠菌的DNA 用3
H 标
记, H2O 2 处理后显示通透性屏障破坏, 大分子(DNA 等)漏
出。DNA 的碱基及其间的氢键被破坏, H2O 2 浓度增加到
10%时,DNA 电泳带几乎完全消失, 说明DNA 核酸已降解
或断裂。经H2O 2 处理后白色念珠菌酸性磷酸酶和琥珀酸脱
氢酶活性降低或漏失16～18
。
3 . 6 . 5 过氧戊二酸 1978 年西德的Heinz Eggensperger
等利用戊二醛酐和双氧水合成了液体型的过氧戊二酸。目前
已作为一种灭菌剂和消毒剂应用于医学消毒和灭菌。以白色
念珠菌为指示菌, 测定了过氧戊二酸对真菌的杀灭作用, 发
现真菌对过氧戊二酸的抵抗力比细菌芽胞更强, 用 2%浓
度,作用60m in, 杀灭率才达到99. 9%以上。用1%浓度要达
到同样消毒效果, 需要作用120 m in 5
。
3 . 7 烷基化气体消毒剂
3 . 7 . 1 环氧乙烷 又名氧化乙烯, 是一种杂环化合物。被
誉为继第一代灭菌剂甲醛之后的第二代化学灭菌剂。环氧乙
烷可杀灭各种真菌和酵母菌。北京市防疫站(1976)用环氧乙
烷杀灭贮粮中的真菌取得较好效果5
。环氧乙烷杀灭真菌,
需 80～ 176 mgö L 作用 0. 5～ 16 h 6
。
3 . 7 . 2 环氧丙烷 是一种广谱杀菌剂。Ramak r ishna 等
(1991)研究了环氧丙烷气体熏蒸对大麦种子上微生物的杀
灭作用和对种子发芽的影响, 发现 2 400 mg . hö L 的浓积时
处理, 可杀灭所有真菌19
。
3 . 7 . 3 乙型丙内酯 是烷基化气体灭菌剂, 是目前杀菌作
用最强的一种。使用浓度为25～ 50mgö L 时, 可有效地杀灭
头癣小孢菌、须发癣菌、黑曲霉菌、皮炎芽生菌、絮状表皮真
菌、红色毛菌、大小芽胞菌等5
。Hoffman 用Ct90值(空气中
灭菌剂的浓度,mgö L x 杀灭 90%微生物所需的时间, 分钟)
比较了几种气体灭菌剂对枯草杆菌黑色变种芽胞的杀灭作
用, 结果发现, 其作用比甲醛强 25 倍, 比环氧乙烷强 4 000
倍, 比溴甲烷强 50 000倍20
。
3 . 8 季铵盐类 是一类低效消毒剂, 主要有苯扎溴铵、度
米芬、消毒净、百毒杀等。苯扎溴铵, 化学名称为十二烷基二
甲基苯甲基溴化铵, 只能杀灭一般细菌繁殖体, 对真菌效果
甚微。有人用 1∶3 000～ 1∶60 000 浓度的西白林溶液, 于
37℃下能有效杀死念珠菌、毛发癣菌、隐球菌和子孢子菌4
。
度米芬, 化学名称十二烷基二甲基乙苯氧乙基溴化铵, 是一
种杀菌作用较强的季铵盐类消毒剂。但对分支杆菌和真菌的
杀灭作用不好5
。也有报道0. 1%苯扎溴铵溶液, 1 m in 内可
杀灭白色念珠菌和新生隐球菌6
。
3 . 9 氯己定 氯己定(洗必泰) (H ibitane)是Davies 等于
1954 年在寻找新的抗疟药过程中发现的。化学名为 1, 62双
(正一对氯苯双胍)己烷。又名双氯苯双胍己烷。氯己定对某
些真菌仅有抑菌作用5
。0. 1%氯己定溶液, 于8～ 10m in 内
可杀灭白色念珠菌和新生隐球菌6
。
总之, 与消毒剂对细菌和病毒的杀灭作用研究相比, 消
毒剂对真菌的杀灭作用研究得还不多, 还不深。随着真菌感
染在医院感染中的比重越来越大, 今后这方面的研究, 尤其
是消毒剂对真菌杀灭机理的研究将会日益引人注目。
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