【新手福利】初识 外泌体 五
大昌华嘉Particle Metrix,纳米颗粒跟踪分析仪
本周的周总结会在周日准时发送给大家。今天给各位新进外泌体领域的朋友第五期基础知识介绍。今天主要科普如下。
随便放张图,这样可以让推文显得长一点~
长~长~长~ 大家都喜欢长的么? 嘿嘿
1、抽提外泌体RNA使用什么试剂好?
这是hzangs被问的次数最多的问题之一。应该算是新手们经常遇到的主要问题之一。分情况吧,如果组里很有钱,那就捡着贵的试剂盒买,八九不离十,你会拿到不错的RNA抽提结果。如果组内经费紧张,那hzangs推荐使用trizol来搞定外泌体RNA抽提。说到trizol抽提外泌体RNA肯定很多人鄙视我,认为我在胡扯,很多人尝试trizol抽提外泌体RNA都没有成功。其实我没有胡扯,原因很简单,你们用trizol抽提外泌体RNA的姿势不对。你们要采用优雅的姿态才好。如何使用trizol优雅的抽提外泌体RNA,请去论坛下载hzangs的PPT。里面有一个添加剂是必须的!这玩意很便宜,打折的时候买,相当于一个反应一块多钱。添加剂在将水相转移到新EP管后,加入异丙醇之前按照说明书的用量加到水相中即可(添加剂是两个成分,两个成分都要加!!!竟然有人告诉我,他们没看懂说明书…)。其他姿势跟常规抽提一毛一样。
附:
给伸手党的PPT下载链接:http://www.exosome.com.cn/forum.php?mod=viewthread&tid=2801&extra=page%3D1&_dsign=28eb5a42
2、WB检测外泌体蛋白前需要裂解外泌体吗?
问这个问题的太多了。简直被这个问题烦死。在这里强调一遍,以后不会再回答类似问题了哦。裂与不裂都可以,怎么样可以得到你想要的结果,就怎样去操作就行了。值得注意的一点是:整个实验请保持一致,不要这个实验裂解了,另一个没裂解,到下一个实验又裂了…时间宝贵,大家不要太纠结。
说点题外话,目前细胞外囊泡领域的方法学并不完善,导致很多实验让新手很头疼。Hzangs的建议就是,别纠结,按照生物学实验的常规思路设计实验并设立严格对照,然后按照能做出自己想要阳性结果的方法做下去就好。
好了,这一期的科普就扯到这里吧,大家好好消化一下。
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