慢病毒载体的详细介绍

病毒是一种生物制剂，其在感染时可以有效地将其遗传物质引入靶细胞，并依赖宿主细胞进行复制。载体可以携带目的基因进入细胞，代替野生型病毒基因。因此，非复制载体缺乏在细胞中自我繁殖的遗传信息，但仍保留向靶细胞引入目的基因的能力。慢病毒（LV）属于逆转录病毒家族（逆转录病毒，慢病毒属）。LV是目前最实用的基因载体，也是基因治疗应用中重要的研究工具，因为其可以感染细胞并使携带的基因整合到基因组上长期稳定的表达。人类免疫缺陷病毒I型（HIV-1）可能是已经研究的慢病毒中最适用的，虽然其致病性早就被人们所知，但是艾滋病病毒衍生的载体载基因治疗中的应用越来越受到人们关注，尤其是其在分化和不分裂的细胞的研究。此，已经有相当多的研究致力于设计具有更高生物安全特性的LV。此外，非基因治疗LV的应用也得到了广泛的研究，包括基于RNA干扰的哺乳动物细胞稳定基因敲除的基因功能的研究。虽然在实验研究中使用LV可能更倾向于它们的功能特性，包括提高生产力和/或转染效率，但更安全的载体的设计有助于提高实验的安全性。

LV被认为是重组病毒，还是细胞转染工具LV，这主要可能取决于涉及活动的目的或类型的若干监管规定和指导方针。在使用LV时，相关法规、指南做出了规定：（i）在工作场所，保护工人远离生物制剂暴露的风险；（ii）操作规范，正确谨慎处理转基因释放的（微）生物体或生物体含有重组DNA分子；（iii）保证人或兽用生物制品和药品的安全性，如使用LV的人员和LV转染的细胞

虽然用于治疗目的的LV或慢病毒转导细胞的使用产生了一些重要的问题包括质量、疗效、安全性、伦理、社会和监管问题，但是本次探讨的范围是限于LV在研究活动的生物风险评估。我们的目标是概述目前用于改善载体生物安全的不同策略，并比较最新的慢病毒包装系统。虽然这次探讨的重点是由单独的载体构成的危险，但是我们也认识到LV风险评估也应考虑到与转基因相关的危害。在LV中克隆癌基因或使shRNA介导的肿瘤抑制基因的敲除显然是需要严格的生物安全措施实施的高风险操作。本文主要阐述与宿主系统有关的载体选择，目前针对LV使用的生物安全建议以及较安全的LV生产系统。