酶联免疫吸附实验(ELISA) 技术服务
酶联免疫吸附实验(ELISA) ,即将已知的抗原/抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原/抗体反应在固相表面,通过底物颜色的变化来检测和定量大分子抗原和特异性抗体等。该技术具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点,已广泛用于生物/医学领域检测各类样本(如血清、血浆、唾液、细胞培养上清液和尿液等)中目的分子。
ELISA检测流程图
样本准备要求
血清采集要求:用无抗凝剂红头管/普通EP管采集全血样本,预留至少1/5空间便于血清分离,采集后室温静置20-30min分钟或4℃冰箱过夜,3000r/min,离心15-20min,取上清于EP管中,-20℃或-80℃保存运输。
血浆采集要求:用肝素钠绿头管/EDTA紫头管采集全血样本,预留至少1/5空间便于血浆分离,采集过程中缓慢摇匀采血管,使血液与抗凝剂充分混匀,室温静置20-30min分钟或4℃冰箱过夜,3000r/min,离心15-20min,取上清于EP管中,-20℃或-80℃保存运输。
组织匀浆上清采集要求:用预冷生理盐水冲洗组织,去除残留血液与其他物质,称重;按匀浆介质体积总量(ul)是组织块总量(mg)的9倍,制备成10%的匀浆液,加入预冷匀浆器中匀浆/液氮反复冻融充分研磨,3000r/min,离心15-20min,取上清于EP管中,-20℃或-80℃保存运输。
细胞培养上清/尿液/胸腹水/脑脊液采集要求:收集细胞培养基/尿液/胸腹水/脑脊液于EP管中,3000r/min,离心15-20min,取上清于EP管中,于-20℃或-80℃保存运输。
注意:
1.红细胞易破碎,请在进行血清、血浆样本收集时,请勿剧烈晃动样本管。
2.样本采集前须了解检测指标是否足够稳定,部分激素类指标不稳定需添加抑肽酶;
3.样本保存建议:1周内使用4℃保存,1个月内使用-20℃保存,一个月以上使用请-80℃保存。
4.冰冻样本保存中途应避免反复冻融,多次取用建议分装多份保存。