技术达人精品课20180131-王华老师【Q&A】

2018年1月31日的“技术达人精品课”上，伙伴们针对《术中冰冻制片技术流程与质控要点》提出疑问，王华老师对问题进行了分类，对部分提问进行回答。

王中华

老师，乳腺的组织脂肪比较多，怎么能切的更好呢？

凯哥

脂肪组织温度多少合适？脂肪组织有什么好方法？

马后炮

脂肪组织中夹杂着一小部分乳腺组织，如何切片才能保证组织完整性？

王华老师

脂肪组织或脂肪含量多的组织，冰冻切片是有困难的，一般采取以下几个手段努力把它切出来，满足诊断需要：

1、 技术员对于自己不能切除片子的含脂肪多的组织，冷冻前做两张组织印片。

2、 脂肪含量非常多的非淋巴结组织，如乳腺及切缘，可以把组织放在吸水纸里，用适当的力度轻压组织数下，让吸水纸把脂肪尽量吸掉一些，组织中的油脂少了，冷冻后切片就容易多了。此操作的关键点是要掌握轻压组织的力度，要把油脂挤压出来，又不能把实质组织细胞压坏了。

3、 组织夹头温度调低，低于-30℃以下切片。但对于实质组织或肿瘤组织与脂肪混杂在一起的，以把实质组织切片良好为目的，具有诊断价值的组织能切出来是主要目的。在鱼与熊掌不能得兼的情况下，明确诊断目的，两权相害取其轻。

4、 技术员加强与医生的沟通协作，诊断医生加强与临床手术室的沟通协作，促进相互理解。

王莉shirley

冷冻锤遇到含水量比较多的组织，冻过了有裂隙怎么办？

王华老师

1、 含水多的组织，冷冻前用吸水纸吸水是重要的操作步骤。

2、 用冷冻锤速冻组织，注意冷冻时间，组织一凝固就及时把冷冻锤移除开始切片。如果不能马上切片，也把组织冷冻锤拿掉，把组织移开速冻台，在等待切片的过程中，组织温度与-16℃~-18℃的箱温渐渐平衡，切片时就平整了。

 任红岳

王老师，甲状腺切片中的小黑珠如何避免，谢谢。

王华老师

我不知的您所说的甲状腺“小黑珠”是不是胶质中出现的小“圆圈”。如果是如下图那样的小圆圈，如果冰冻固定液的固定效果好，胶质保存得好，这样的现象是不能避免的。因为这样的小圆圈是贴片过程中，被“封”在胶质中的小气泡。

葵葵

不同组织冰冻时间的参考

王华老师

说实在的，我从来就没有考虑过设定冷冻时间。因为我们做冰冻切片的过程中也不可能去测那个温度和时间。不同组织的大小，不同组织的类型，包埋剂的多少，都会影响组织冷冻凝固的时间，很难做出精确设定。我的操作就是注意以下几个方面：

1、 速冻台设定温度-30℃以下。

2、 箱体和组织夹头温度设置在-16℃~-18℃。

3、 冷冻锤速冻组织，组织一凝固了就开始切片。如果不能立即切片的，就及时移开速冻锤，把组织移开速冻台，在等待切片的过程中，组织温度与-16℃~-18℃的箱温渐渐平衡了。

4、 如果一时没及时把组织移开速冻台，导致组织过冷，就把组织拿到室温里放置十来秒，整体复温后再切片，复温以组织不出现溶解为度。

蟲蟲

冰冻锤直接压组织上面，细胞不会被压扁吗？

王华老师

1、 如果说会压扁细胞，也是表面的细胞受到一定的影响，但表面的细胞在修片的过程中是会被修掉的。

2、 用冷冻锤，对于薄的囊壁样组织的冷冻是需要一定技巧的。我的经验是，把囊壁在包埋剂中卷成一个多层同心圆，冷冻锤放上去之后，用手悬住冷冻锤，等包埋剂有点凝固了再放手。

内蒙古网友

请问AFA液的配比？

王华老师