基因敲除斑马鱼构建技术

斑马鱼是一种近年来发展非常迅速的模式动物,在生物医学研究领域有越来越多的应用。

斑马鱼和人类的基因同源性85%以上,疾病信号转导通路高度保守,某些疾病相关基因与人类基因保守性高达99%,这意味着在其身上做药物实验所得到的结果在多数情况下也适用于人体。

斑马鱼作为模式动物,还具有以下的优点:

1、 与人类同属于脊椎动物

2、 个体较小,因此养殖需要的场地空间较小

3、 繁殖力强,可进行高通量筛选

4、 体外受精,便于繁育

5、 药物用量小

6、 早期透明,早期发育迅速,受精后24h主要器官已建成,受精后七天内部器官清晰可见,可以活体进行荧光观察

利用CRISPR/Cas9靶向基因敲除技术,可高效快速地在斑马鱼系统中实现目标基因的定点敲除构建基因敲除斑马鱼,并且可以根据需要引入荧光标记,提高筛选效率,并方便观察。

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