颇尔切向流过滤使用笔记分享

简介:颇尔切向流超滤(TFF)能快捷地、高效地进行生物的分离与纯化处理;可用于低至10ml,高达数千升样品溶液的浓缩和脱盐处理;也可以用于不同大小生物分子大小的分离、细胞悬液收集、以及发酵液和细胞裂解液的澄清。

MinimateTM实验室切向流超滤系统

应用:

  • 蛋白质、肽或核酸(DNA/RNA/寡核苷酸)的浓缩和脱盐;

  • 从澄清后的细胞培养介质中回收抗体或重组蛋白;

  • 处理对应金属敏感的酶和分子;

  • 分离不同尺寸的生物分子;

  • 浓缩病毒或基因治疗载体;

  • 柱层析前的样品制备;

  • 凝胶过滤后的样品浓缩;

  • 去除水、缓冲液、介质溶液的致热源

Minimate切向流超滤滤包、Omega滤膜

2、     使用基本流程

  1. 2.1冲洗滤膜:

首先根据你需要过滤的物质使用缓冲液进行冲洗滤膜,将缓冲液倒入Feed罐中,开启机器,速度调节为50ml/min(如图所示),vent端的管子放入到废液瓶里,可以用夹子夹住Feed or Rentate 端的管子,增加压力,我以滤出滤液100ml为基础,可以根据的需要多循环几次,完成冲洗。

进样:

完成冲洗后,将Feed罐中的缓冲液倒掉之后,将待过滤样品倒入feed罐中,开始操作,可以夹住Feed or Rentate 端的管子,增加压力(注意压力不可大于30psi),开始收集样品,收集大分子(Feed or Rentate端流出的液体);收集小分子(Vent or Filtrate端流出的液体)。

换样:

如需从A样——B样,待已过滤的A样收集好之后,先用缓冲液冲洗滤膜,至滤液滤出100ml,进行B样的进样,操作与上述进样操作相同;

消毒:

操作完成后,用0.1mol/L(过0.45微米的滤膜)NaOH进行清洗,我大概冲洗20min左右,完成。

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