Trypsin-EDTA消化液
胰蛋白酶(Trypsin)是一种在许多脊椎动物的消化系统中都能发现的丝氨酸蛋白酶(Serine protease)。它水解蛋白质,其水解位点位于赖氨酸或精氨酸的羧基端,在pH 7-9(37℃)时具有最佳活性。Trypsin主要用于将贴壁细胞从培养皿表面消化下来,成为悬浮液。EDTA充当金属螯合剂,将其添加到Trypsin溶液中以增强活性。加入EDTA以从细胞表面去除Ca2+和Mg2+,这允许Trypsin水解特定的肽键。Trypsin和EDTA溶解于不含Ca2+和Mg2+的PBS缓冲液中,从而配制成Trypsin-EDTA消化液。PBS缓冲液模拟了人体pH、渗透压和离子浓度,有助于维持细胞在体外的活性。细胞消化下来后,可通过添加含有血清的培养基来终止Trypsin活性。
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