Hepatology：血清外泌体包含原发性硬化性胆管炎和胆管癌的蛋白质生物标志物

模式图

胆管癌（Cholangiocarcinoma，CCA）是由多种胆道系统癌症组成的，其特点是预后差。原发性硬化性胆管炎（primary sclerosing cholangitis，PSC）等一些病因是胆管癌的危险因素。在进行非侵入性鉴别诊断时，CCA与肝内胆管癌（intrahepatic CCA，iCCA）、肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）之间的的鉴别非常困难。在此研究前还并没有PSC、CCA或HCC可以使用的准确的非侵入性生物标志物。为了寻找新生物标志物，来自西班牙巴斯克大学的研究人员从CCA（n =43）、PSC（n=30）和HCC（n =29）患者和健康个体（对照组，n=32）中分离出血清的细胞外囊泡（EV），并检测其蛋白质含量。通过使用纳米粒子跟踪分析（NTA），研究人员发现HCC血清的EV浓度高于其他各组。圆形的形态（透射电子显微镜）、大小（NTA为〜180nm直径）和标记物（免疫印迹检测CD9、CD63和CD81）表明，被检测的大多数血清EV是外泌体。蛋白质组图谱（通过质谱）显示出多组差异表达的蛋白质。这些蛋白质中的几种显示出较高的诊断价值，CCAvs对照组的ROC曲线下最大面积（AUC）为0.878，CCA I-II期vs对照组为0.905，PSCvs对照组为0.789，PSC非肝硬化vs对照组为0.806，CCAvsPSC为0.796，CCA I-II期vsPSC为0.956，HCCvs对照组为0.904，iCCAvsHCC为0.894。通过对人CCA细胞的EV的蛋白质组学分析显示，与正常人胆管细胞释放的EV相比，其中的致癌蛋白的丰度更高。在免疫缺陷小鼠的肝脏中原位植入人CCA细胞，可检测到含有一些类似人致癌蛋白的EV在血清中释放。研究人员得出结论，CCA、PSC和HCC患者血清EV中发现了新的蛋白质组学特征，在诊断上具有潜在的有效性。

图1：CCA、PSC、HCC和健康对照组的EV的比较

图2：上）维恩图比较了每种情况下的蛋白数量和总蛋白数量。下）CCAvsPSC患者，CCA、PSC或HCC患者vs对照组的血清EV的蛋白质差异分析（DAVID生物信息学数据库）。

图3：人CCA的小鼠原位移植模型的血清EV中鉴定出人源蛋白质。

参考文献：Arbelaiz A, Azkargorta M, Krawczyk M, Santos-Laso A, Lapitz A, Perugorria MJ, Erice O, Gonzalez E, Jimenez-Agüero R, Lacasta A, Ibarra C, Sanchez-Campos A, Jimeno JP, Lammert F, Milkiewicz P, Marzioni M, Macias RIR, Marin JJG, Patel T, Gores GJ, Martinez I, Elortza F, Falcon-Perez JM, Bujanda L, Banales JM. Serum extracellular vesicles contain protein biomarkers for primary sclerosing cholangitis and cholangiocarcinoma. Hepatology. 2017 May 26. PubMed PMID: 28555885.