包装出来的慢病毒感染细胞效率低?

理论上LV感染细胞的能力很强,而且能感染分裂和非分裂期的细胞,但为什么我的感染效果总是不理想?影响LV感染效果的因素有哪些?

1) 细胞类型:有些细胞本身就较难被感染,如某些原代细胞,可考虑加大病毒量或采用浓缩病毒进行感染。

2) 细胞生长状态:感染细胞前,需要保证细胞处于良好的生长状态,以及合适的生长密度,细胞膜的流动性、与细胞表面的接触面积及表面受体的表达丰富等均会影响病毒感染细胞的效果;另外对于悬浮细胞,可以采用离心感染的方法。

3) 病毒质量:包装出来的LV应尽量避免冻融,反复冻融会降低病毒的滴度(每次约降低10%),若一次用不完建议分装后储存于-80℃,但即使-80℃也不建议超过6个月;对于4℃保存的LV则尽量3天内用完。

另外,也可考虑加入Polybrene助感染试剂增强感染效果,但Polybrene本身具有细胞毒性,谨慎使用。

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