MSS型转移性结直肠癌的免疫治疗新策略（二）
使用主动免疫细胞，绕过原位免疫调节
除了提供免疫增强信号或注射预先激活的DC外，还可以绕过所有原位免疫启动，为患者注射激活的细胞毒性免疫细胞产品。在20世纪60年代和70年代，对自体TIL进行过继细胞疗法(ACT)的开创性研究帮助建立了T细胞可以识别和杀死肿瘤细胞的概念。这一策略在转移性黑色素瘤患者中显示出令人鼓舞的临床反应。
（细胞疗法的示意图。T细胞或NK细胞可以从患者或健康捐赠者身上分离出来，并进行体外扩增。在这个过程中，他们可以通过基因工程来表达CAR或TCR变种。一旦输注，这些杀伤细胞可以加强现有的免疫反应或产生新的免疫反应。）
肿瘤浸润的淋巴细胞（TILs）疗法：TILs是具有高度异质性的淋巴细胞亚群，不同的细胞亚群在TME中发挥着不同的作用。其包含具有正向调节免疫应答的免疫细胞，如树突状细胞(Dendritic cells，DC)、CD8+细胞毒性T淋巴细胞、自然杀伤(Natural killer，NK)细胞等。它们通过对肿瘤细胞的识别、杀伤和清除，实现肿瘤免疫应答。TME也包含具有负向调节免疫应答的免疫细胞，如肿瘤相关巨噬细胞、调节性T细胞、髄源性抑制细胞等。它们会分泌大量的免疫抑制细胞因子和生长因子，如IL-6、IL-10、VEGF、TGF-β等，抑制上述DC、CD8+细胞毒性T淋巴细胞、NK细胞的激活，从而使肿瘤细胞逃脱免疫监视，最终导致肿瘤形成、侵袭与转移。TILs疗法最先由Steven·Rosenberg及其团队研发，目前已在在黑色素瘤、宫颈癌、乳腺癌等多种实体瘤上表现出令人惊喜的效。国内有源自于外周血的TILs疗法处于临床阶段，期待能取得与源自肿瘤组织的TILs同样的效果。
NK细胞治疗：NK过继免疫治疗包括同种异体和自体NK的过继治疗。自体NK细胞KIRs受体和MCH-Ⅰ配体结合能抑制NK细胞的活化，而同种异体或脐带血来源的NK细胞KIRs受体和MCH-Ⅰ配体不匹配，故打破了这种限制，有效活化NK细胞，启动抗肿瘤反应。过继的NK细胞与DC相互作用，产生的INF-γ能有效刺激Th1辅助细胞，从而进一步增强T细胞抗肿瘤免疫反应。同时，肿瘤致敏的NK细胞分泌IFN-γ能增加肿瘤细胞MHC-Ⅰ分子的表达，从而促进细胞毒性T细胞的特异性识别和杀伤肿瘤细胞。此外，临床前的研究表明，外周血NK细胞的ACT可以通过ADCC与基于抗体的靶向治疗(如西妥昔单抗)协同作用-独立于RAS/RAF突变状态。两项I期试验证实了该药在胃肠道癌症患者中的安全性和生物活性。
CAR-T细胞疗法：CAR-T细胞是指经遗传修饰以表达嵌合抗原受体(Chimeric antigen receptor，CAR)的T细胞，CAR由4部分构成，即细胞单链抗体区(Singlechain antibody fragment)、跨膜结构域、细胞内信号传导(通常是CD3ζ链)和协同刺激信号域(CD28、41BB、OX40等。CRC中研究最广泛的CAR目标是CEA。在结直肠癌模型中显示出有希望的体内结果的更多CAR的靶点包括CEA、EPCAM、GUCY2C、TM4SF1、NKG2D和HER2。针对GUCY2C和TM4SF1靶点的CAR-T细胞治疗用于不可切除难难治性结直肠癌的临床正在开展，初步的结果显示具有非常不错的疗效。其他如双皮质醇样激酶1(DCLK1)--一种建议的癌症干细胞标记物--显示出临床前的潜力。此外，CAR-T细胞可能被利用来靶向CAF：带有抗成纤维细胞激活蛋白(FAP)的CAR-T细胞显著抑制各种实体肿瘤的皮下生长。然而，结直肠癌的疗效并未得到令人信服的证明，这可能是由于结直肠癌相关的TME具有很强的免疫抑制作用。事实上，这个问题通常可能会限制(CAR)T细胞的存活。值得注意的是，重大毒性与CAR-T细胞疗法有关。潜在的减轻毒性和可能提高疗效的策略可能涉及局部给药CAR-T细胞。细胞回输前使用皮质类固醇激素/托珠单抗或可减少细胞因子释放综合症以及神经毒性事件的发生。
CAR-NK细胞疗法：NK细胞因其更好的安全性而受到普遍赞赏，它也已被转基因来表达CAR。NK-92细胞系被设计成表达针对CEA和EPCAM的CAR。过继转移任何一种药物均可抑制小鼠皮下人结直肠癌移植瘤的生长。此外，腹腔内输注同种异体NKG2D CAR-NK细胞减轻了一例大肠癌肝转移患者的肿瘤负担。在进一步尝试将NK细胞固有的细胞毒力与特定的识别能力配对时，NK-92细胞已经配备了功能性TCR；赋予T细胞表型特征，同时保留了NK细胞效应功能。另一种不受HLA限制的方法是最近克隆的TCR，它通过结合不变的HLA相关MR1，可以识别各种类型的癌细胞。像这样的方法可能是朝着安全、有效和现成的靶向免疫疗法迈出的又一步。然而，ACT治疗结直肠癌等实体肿瘤的临床转化仍处于早期开发阶段。