临床胚胎学家实验室工作:卵母细胞采集和分级
在医生开始提取卵母细胞之前,胚胎学家要确保一切都准备好迎接配子的到来。一切都应该像母亲的身体。所以他们检查房间、培养箱和显微镜台的温度。此外,房间的光线必须随时调暗,以备卵子和胚胎。所有培养基和培养皿都准备好迎接卵母细胞的到来。医生吸入卵泡液和卵母细胞,然后将抽吸液和冲洗液交给胚胎学家。在显微镜下,胚胎学家立即检查液体并寻找它们。如果发现,立即冲洗并转移到为其准备的受精培养基中,然后转移到培养箱中,以便以后检查和分级。成熟卵母细胞放置在培养箱中2-8小时直到受精。未成熟的卵母细胞需要更多的时间,大约24-35小时,才能成熟并准备受精。
卵母细胞的分级取决于受精的方式。如果使用传统的授精方法,它们将按原样分级,周围有积云和辐射冠。通常成熟的太阳看起来像一个美丽的太阳,周围有清晰的扩大的光线。如果受精方法是卵胞浆内单精子注射(ICSI),胚胎学家需要在卵母细胞周围没有卵丘或电晕的情况下自行检查。为此,他们首先用注射器机械清洁卵母细胞周围的细胞,然后在一种叫做透明质酸酶的酶中剥离几秒钟,以完成清洁。透明质酸酶是精子头部在受精过程中释放的一种酶,用于溶解细胞周围的卵母细胞,使其与卵母细胞结合。
现在胚胎学家在显微镜下对卵母细胞有了清晰的观察,他们可以对它们进行分级。一个球形的卵母细胞上附着着一个极体,称为成熟卵母细胞,可在2-8小时内受精。如果卵母细胞在培养箱中24小时不成熟,卵母细胞就不可能发育成球形。另外,如果卵母细胞破裂,或没有球形和极体,则视为异常,将被丢弃。
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