PLT-I, PLT-O,PLT-F三种通道计数血小板的原理

作者:果子哥

在血常规检查中,血小板计数是一项重要的参数。血小板计数往往有很多影响因素,导致计数结果与实际不符,针对各种影响因素,仪器法有PLT-I, PLT-O,PLT-F三种通道计数血小板。

就拿我们平时常用的希森美康系列仪器,分别有电阻抗法PLT-I通道,光学法PLT-O,PLT-F通道来计数血小板,那这三种通道计数,基于什么原理?各有什么优势呢?根据希森美康官方介绍,结合临床检验实际工作,我们尝试总结一下三种方法计数的优劣。

1.电阻抗法(PLT-I)

原理:血小板颗粒通过检测小孔时,会形成脉冲,脉冲振幅衡量血小板体积,振幅越高,体积越大,脉冲数量越多,血小板数量越多,这是典型的根据颗粒大小来区分血小板。如图一,血小板直方图,横坐标代表体积,纵坐标代表检测到的不同体积的血小板的频率。

优势是:精密度好,应用下来,重复性好,简单实用。

缺点是:小红细胞、碎片,脂血可能会导致计数结果假性增高,因为红细胞和血小板是在一个通道内进行检测的,笔者实践下来,发现一些贫血患者红细胞形态异常病例,确实对血小板计数有影响。 另外,大血小板,微小血小板,以及血小板聚集会导致假性减低。

图一

2.光学法PLT-O通道

原理:通过采用聚次甲基等荧光染料对核酸荧光染色,激光散射多维度分析,其中前向散射光区分体积,荧光强度区分血小板与红细胞,血小板荧光强度明显强于红细胞。散点图见图二。

PLT-O通道实际上是网织红通道。网织红通道检测网织红细胞时,对网织红核酸成份染色时,也对血小板进行染色。

优势是:可以有效去除小红细胞、红细胞碎片干扰。

缺点是:血小板计数颗粒辨识度,精密度都不如经典的PLT-I通道,白细胞碎片可能也被染色,产生假性增高。

图二

3. 光学法PLT-F通道

单独PLT-F通道,采用特殊新型荧光染料,以噁嗪为主,只针对血小板进行染色,具有较高的特异性,而且对低值血小板样本进行5倍颗粒分析技术。 见图三。

其优势是选择性染色血小板,网织红细胞,红细胞等难以染色,避免红细胞碎片影响,特异性强;5倍颗粒分析计数,提高检测结果精密度,使低值血小板更精确;可以有效排除微血小板的干扰;高灵敏度地检出血小板凝集。

图三

三种通道检测血小板,各有优势,当然成本也不一样,实验室出于经济,实用及效率原则,可以有选择的使用不同方法检测血小板。一般在PLT-I通道检测不能排除血小板计数干扰的情况下,多采用PLT-O和PLT-F通道加以纠正和排除,当然经典的手工计数,依然是血小板校准的金标法。

来源:本文为医家小二首发,作者:果子哥,转载请联系我们。

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