免疫共沉淀实验经验分享

你可能做了很多Co-IP实验，经常遇到的问题是检测不到与诱饵蛋白X相互作用的靶蛋白Y，或者检测得到的信号太弱。你是否也遇到过呢?别急，小编贴心总结来了!

　　出现以上问题的原因可能有：

　　1)裂解液中的去垢剂过于剧烈;

　　2)蛋白与蛋白之间的相互作用太弱或者不稳定。

　　通常的解决办法如下：

　　1)降低去垢剂浓度或者更换去垢剂种类(SDS>Trition>NP40>Digitonin>CHAPS);

　　2)选择亲和力高的抗体以捕获更多的诱饵蛋白X从而捕获更多的相互作用蛋白;

　　3)通过细胞转染过表达的方式提高诱饵蛋白X的含量;

　　4)加入化学交联剂，增强诱饵蛋白X与相互作用蛋白的结合;

　　5)选择诱饵蛋白X或者相互作用蛋白含量高的样品进行免疫共沉淀实验。