Sihler肌内神经染色法改良法
Sihler肌内神经染色法(Charles Sihler,1895):使整个标本的软组织变成透明或半透明,完整显示组织内部的神经。但其它非神经组织染色不足。
改良的Sihler染色法
⑴新鲜标本以10%甲醛固定约4周,大块组织相应延长。
⑵流水冲洗24小时。
⑶陈旧标本用5%氢氧化钾2~3天除去色素,改用3%氢氧化钾5周左右(人大块组织)。
⑷入Silher Ⅰ液脱钙约4周,每周换液一次。至肌肉透明。
Ⅰ液:冰醋酸10毫升,甘油20毫升,1%水合氯醛120毫升
⑸流水冲洗30分钟。
⑹入Sihler Ⅱ液2~3周至神经着色,每周换液1次。
Ⅱ液:成熟的Ehrlich苏木精20毫升,甘油40毫升,1%水合氯醛240毫升
Ehrlich苏木精:苏木精2克,无水酒精100毫升,甘油100毫升,蒸馏水100毫升,冰醋酸10毫升,钾明矾15克。
⑺入Sihler Ⅰ液4~8天使肌纤维脱色至肌内神经呈紫黑色,肌肉呈淡蓝色。
⑻流水冲洗30分钟。
⑼入0.05%碳酸锂水溶液浸泡1~2小时。
⑽将肌肉的筋膜剔除。
⑾依次经40%、60%、80%及无水甘油各4天(约需16天)。
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