荧光实验怎么做？

什么是荧光？冷光显微镜荧光利用光源激发——。荧光波长＞激发波长（损失热能）有不同程度的衰减培养的悬浮细胞、粘附细胞组织固定活体组织一旦停止血液循环和物质代谢就会因物质代谢障碍产生一系列的生物化学和组织学改变，并导致形态学上可见的细胞器变化和细胞组织的形态改变直至腐败自溶。选择最佳固定液标准是：（1）最好地保持细胞和组织的形态结构；（2）最大限度地保存抗原的免疫活性。一些含重金属的固定液在免疫组化和细胞化学技术中是禁用的；（3）不要用可能带有自发荧光的固定剂，如带有苦味酸的固定剂，还有甲醛升汞固定液，会使上皮细胞产生非特异性荧光；（4）固定剂的选择、固定时间、温度和PH值都会影响实验结果。单纯固定液（1）4%中性甲醛固定液：最常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。中性甲醛是以PH7.2-7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处，保存时间不超过一个月。100ml6.5g磷酸二氢钠4.0g蒸馏水900ml甲醛（40％）100ml95％乙醇900ml无水醋酸钠1.25g升汞6.0g蒸馏水90ml使用前加入甲醛10ml饱和苦味酸水溶液（约1.22%）75ml甲醛25ml冰醋酸5ml（2）乙醇固定液：使用时以80%-95%的浓度为宜，具有硬化、固定、脱水等作用，对组织渗透力较弱，因此很少单独使用，但其保存组织中的核酸强于中性甲醛，故常用于有核酸操作的实验或检查，如果用于证明尿酸结晶和保存糖原，可用于100%乙醇固定组织。（3）4%多聚甲醛固定液：主要用于培养细胞的固定。混合固定液乙醇-甲醛（乙醇-福尔马林，AF）固定液（2）：多用于固定淋巴组织。染色前应进行脱汞沉淀处理。Bouin固定液（4）：穿透能力强，可很好的固定细胞质和细胞核，特别适用于固定外膜致密的组织，也适用于糖原及尼氏小体的固定。无水乙醇60ml氯仿30ml