流式检测细胞凋亡实验方法

1.样品处理：

（1）取对数生长期细胞，胰酶消化；

（2）终止消化反应，同时吹打使细胞完全分散，离心弃上清；

（3）PBS洗2次，加结合缓冲重悬，调整细胞浓度为1×106个/ml；

（4）取4支流式管，每管加100 μl细胞悬液，并编号1、2、3、4；

（5）2号管加入5 μl  Annexin V-FITC，3号管加入 5 μl PI，4号管分别加入5 μl  Annexin V-FITC和5 μl PI轻轻混匀；

（6）室温(20-25℃)避光孵育 15 min；

（7）每管加 400 μl 结合缓冲液；

（8）300目（孔径40-50 μm）尼龙网过滤，1 h 内上机检测。

2.上机检测及数据处理：