脱钙骨苏木精伊红染色法

用酸类如硝酸、甲酸等脱钙的骨组织，苏木精伊红染色时常出现核浅浆（质）红的情况，处理方法是相应延长苏木精的染色时间（20~30分钟），减少伊红染色时间（数秒）。也可以改用下法，效果很好。

方法：（室温22~25℃）

⑴切片用松节油或二甲苯脱蜡。

⑵无水酒精洗30秒。

⑶入1%火棉胶液浸泡2秒（防脱片），稍干。

⑷无水酒精30~60秒，

⑸经各级酒精下行至水。

⑹1%硫酸钠水溶液3~5分钟。

⑺ 流水冲洗5分钟，蒸馏水浸洗30~60秒。

⑻入苏木精液染色7~15分钟。

苏木精液：  苏木精3克，钾明矾50克，蒸馏水800毫升，碘酸钠0.6克，甘油200毫升，无水酒精5毫升

无水酒精与苏木精研磨，将蒸馏水加热溶解钾明矾。将苏木精倒入钾明矾液，再加入碘酸钠，冷却后加入甘油，摇荡1小时后使用。

⑼盐酸酒精分色5~7秒，流水洗至核呈蓝色。

⑽入0.5%复制伊红液1分钟。

⑾入正丁醇-无水酒精混合液（3：2）分色和脱水。

⑿二甲苯透明，中性树胶封片。

Bock苏木精-伊红染色法

对制作骨发生标本很好。

⑴组织固定于下液8~30天。

固定液：Müller液25毫升，5%甲醛100毫升

⑵ 用von Ebner法脱钙或5%硝酸脱钙。

von Ebner盐酸脱钙液：氯化钠饱和水溶液100毫升加盐酸4毫升（牙齿加20毫升）。每日再加盐酸1~2毫升，直到钙胶尽。入稀氨水中和。

Schaffer硝酸脱钙法：固定后的骨组织入5%硝酸水溶液至组织充分软化为止。对较大的管状骨应经常换脱钙液。然后入5%硫酸钠中和24小时，自来水洗24小时，脱水，包埋。

⑶入5%钾矾水溶液24小时或氯化钠半饱和水溶液6天。

⑷流水洗1~2天。

⑸ 脱水，火棉胶包埋或石蜡包埋（骨发生）。

⑹ 切片用Hansen苏木精染12~18小时。

⑺用甘油冰醋酸等量混合液分化5~20分钟或更久。若脱色过慢，适当减少苏木精染色时间。

⑻ 自来水洗1小时。

⑼ 0.4%伊红75%酒精溶液染5分钟。

⑽95%酒精分色，无水酒精脱水，二甲苯透明，封固。（石蜡切片）

⑾切片经95%酒精，入石炭酸二甲苯、纯二甲苯透明，封固（火棉胶切片）。

结果：钙化骨蓝色，无钙化骨红色。