猪丹毒，正确鉴别的诊断方法与应用场景
诊断系列技术文章——第4篇（猪丹毒）
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我们可以用什么实验室诊断方法来诊断猪丹毒？我应该根据情况选择哪一个方法？如何解释结果？
一、可用的检测方法：
1、病理学
病变的目视检查
优点：
①几乎都具有特征性：急性皮肤病变（轻微隆起），多灶性粉红色至紫色菱形病变。
图1.具有特征性菱形皮肤病变。
缺点：
①除皮肤病变症状明显外，其他病变在其他疾病中都很常见
②通常需要其他诊断确认
2、细菌培养
从病变的组织中分离活菌
样本类型：血液、脾脏、肺、肝脏、肾脏、淋巴结、关节液
优点：
①对于急性病例，细菌很容易在1到2天内繁殖
②在任何实验室（包括内部实验室）都易于操作
③相对成本低
缺点：
①慢性病例可能需要选择性浓缩
②在以前用抗生素处理过的猪的样本中，细菌生长受阻
3、抗菌药物敏感性
体外测试活菌在不同抗生素特定浓度下的繁殖能力
样本类型：血液、脾脏、肺、肝、肾、淋巴结、关节液
优点：
①鉴定对常用抗生素的敏感性或耐药性
②鉴定耐药性趋势
缺点：
①需要进行细菌分离培养
②体外试验可能与体内试验结果略有不同
③某些特定的抗生素可能不需要测试，或者需要单独的测试
④中等成本
4、免疫组织化学（IHC）
检测细菌抗原的存在
样本类型：组织
优点：
①检测病变部位的细菌（良好的因果关系证明）
②可用于慢性病例中或动物接受抗生素治疗时，细菌培养具有挑战性。
缺点：
①必须提交正确的组织样本
②需要比PCR更多的细菌
③仅评估一小部分组织样本
5、聚合酶链反应（PCR）
检测是否存在细菌核酸（DNA）的特定序列
样本类型：组织、全血、血清、口腔液等。
优点：
①非常高的灵敏度（可检测少量细菌）
②可以使用许多不同的样本类型
③中等成本
缺点：
①无法区分活疫苗细菌与野生型感染
6、酶联免疫吸附试验（ELISA）
检测抗体的存在
样本类型：血清
优点：
①动物可以在数月内保持阳性
②许多检测中的抗体水平与保护作用密切相关
③可用于慢性病例
缺点：
①检测到的特异性抗体和检测时间在不同的试剂盒之间可能略有不同
②许多健康的猪都可能是携带者，并且血清学检测呈阳性
③无法区分母体抗体与接触性抗体
④无法区分疫苗与野生型感染
二、结果解释：
1、病理学：
阳性：皮肤大体病理可用于推定诊断
阴性：慢性病例通常不表现为皮肤损伤
2、细菌培养：
阳性：证实疾病
阴性：阴性，或可能需要浓缩，尤其是在慢性病例中，或在感染后后期进行检测
3、抗菌药物敏感性：
易感：如果抗生素能到达目标组织，可能是治疗的好选择
抗性：选择不同的抗生素
MIC：MIC用于确保所选抗菌剂达到目标器官中列出的MIC值
4、IHC
阳性：病变部位有细菌
阴性：阴性，如果在感染后或抗生素治疗后检测发生较晚，则可能漏检细菌
5、PCR
阳性：细菌存在、正在传播并证实疾病。最近使用改良活疫苗接种可导致PCR阳性结果。
阴性：阴性，如果在感染后或抗生素治疗后检测发生较晚，则可能漏检细菌
6、ELISA
阳性：母体抗体或过去接触过疫苗或野生型病毒（通常在接触后>7-10天）
阴性：阴性，或过早发现感染（通常在接触后2至4周）
三、应用场景
1、有皮肤损伤的猪（通常>20 kg）：
确认大体病变为真正的“菱形”，以进行推定诊断
从死猪身上采集脾脏或肝脏，或从活猪身上采集血样进行细菌培养
如果用抗生素治疗过猪，则要求通过选择性浓缩培养
2、慢性关节炎（通常>20 kg）：
收集问题猪的关节液：
个体PCR
选择性浓缩培养
从死猪身上收集滑膜和受影响软骨，用于丹毒IHC
图2.慢性感染猪的关节拭子。