【知识分享】关于动物注射技术，有这一篇就够了
在我们进行动物疾病模型构建的基础研究过程中，往往需要借助注射技术，将药物、病毒载体、荧光染料等注射到动物体内，以构建动物模型，亦或是研究其作用机制及代谢途径等，来观察疾病发生发展规律，研究防治措施。
下面就和大家介绍几种常用的动物注射技术
一、腹腔注射
①抓取小鼠，使其腹部朝上头部略向下垂；
②抓紧背部皮肤使腹部皮肤紧绷，于腹腔下边缘位置(左/右侧)进针；
③针头沿皮下向前推进2-3cm，针头与皮肤呈45°角刺入腹膜；
④回抽无回流物，缓慢推入药物；
⑤腹腔注射宜用等渗药液，不宜刺激性药液；
⑥循环途径：肠系膜上静脉→肝门静脉→肝→肝静脉→下腔静脉→进入血液循环；
⑦参考给药量：0.01-0.02ml/g(小鼠)。
二、脑立体定位注射
①称重、麻醉小鼠；
②用酒精棉擦小鼠头部，剃毛；
③将小鼠头部固定于脑定位仪上，先将小鼠上颚牙齿挂到定位仪上，旋动头部螺旋使其刚好压住老鼠的鼻子，将耳杆插入到小鼠双耳道，调节左右侧耳杆使其头部稳定保持中心位置；
④碘酒、酒精再次擦拭小鼠头部，用手术刀从头部中央划开一个小口，去除颅骨表面结缔组织，暴露前后囟；
⑤将注射针固定于定位仪上，调整注射速度，小心将针头下降至头颅钻孔水平面，按照注射位点参数，将注射针缓慢下降进行注射；
⑥注射完成后，留针5-10min后慢慢将针头退出,以便药物很好的被吸收；
⑦用捏子将伤口两侧皮肤扯到一块，用缝合剪缝好，将小鼠放在热毯上（也可肌肉注射抗生素），便于苏醒；
⑧注射针用PBS清洗，将所用手术器械用酒精擦拭干净，柜台内收拾干净，UV照射三十分钟。
注射部位：Vgat- Cre小鼠VTA
载体：AAV-EF1a-DIO-ChR2(H134R)-mCherry
血清型：AAV2/8
病毒滴度：7.39×1012 VG/mL
注射体积：300-400nl
观察时间：2-3周
三、皮下注射
①抓取小鼠，将小鼠腋窝处正对实验人员；
②注射针从腹腔上边缘刺入皮下，向前推入腋窝处皮下，注意避免注射到皮内与肌肉；
③轻轻抽吸无回流物，缓慢注入药物；
④推针时注射器旋转180度后拔出，防止药液外漏；
⑤循环途径：经皮下和肌肉中的毛细血管吸收，吸收没有静脉注射完全；
⑥参考给药量：0.01-0.03ml/g(小鼠)。
四、眼内注射(玻璃体腔注射)
①麻醉小鼠；
②调整小鼠头位：让小鼠眼球保持角膜缘水平位；
③暴露眼球：上下外拉眼皮，挤出眼球，暴露部分巩膜；
④注射：角膜缘后1mm，注意避开血管，调整注射器，进针；缓慢推注后留针30s，迅速出针；
⑤眼球复位：轻轻按压角膜使眼球进入眼眶内；
⑥动物苏醒后放入笼中饲养。
玻璃体腔注射AAV-Syn-GcaMP6s病毒
五、尾静脉注射技术
①使用小鼠固定器，酒精棉擦拭小鼠尾部，尾静脉肉眼清晰可见；
②距尾尖1/3处小于30度角度进针后见回血，立即注射，进针深度为针头2/3；
③如无阻力，表示针头已进入静脉，可继续注入，注射时如遇阻力，出现白色皮丘，需要在上方1cm处再次注射；
④平缓注射，不可注射含有空气的液体；
⑤注射完毕后，用干棉球按压伤口3-5min；
⑥循环途径：直接进入血液循环；
⑦参考给药量：0.005-0.01ml/g(小鼠)。
注射方式：尾静脉
载体：AAV-CMV-Serpina3n-2A-mScarlet-3FLAG
血清型：AAV2/PHP.eB
注射病毒量：2×1011 VG
注射体积：100ul
观察时间：3周
文章来源：J Pineal Res（IF=15.211）Yu Xi, et al.（2019）Inhibition of SERPINA3N‐dependent neuroinflammation is essential for melatonin to ameliorate trimethyltin chloride- induced neurotoxicity.（点击查看）
六、肌肉注射
①抓取小鼠，使其注射部位针对实验人员；
②将针头垂直迅速刺入外侧肌肉，进针深度为针头2/3；
③回抽针栓如无回血，将药物注入；
④注射完毕后，用干棉球按压伤口3-5min；
⑤药物水溶液吸收十分迅速，适用于油溶液和某些刺激性物质；
⑥循环途径：直接进入血液循环；
⑦参考给药量：0.05-0.1ml(小鼠)。
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