1. 如何利用外泌体高效装载功能性siRNA？

细胞外囊泡（EVs）是通过在细胞之间转移生物分子（包括蛋白质和RNA）介导细胞间通讯的细胞衍生的膜状纳米颗粒。由于其功能性传递RNA的自然能力，EV可能被用作治疗性RNA载体。该治疗用途的一个主要限制是缺乏有效、稳健和可规模化的方法来加载具有感兴趣的RNA分子到EV中。来自牛津大学的研究人员通过系统评估关键参数的影响，包括孵育时间、体积、温度和EV/cc-siRNA比率，评估和优化了用胆固醇结合的小干扰RNA（cc-siRNA）负载EV的方法。EV负载在最高siRNA保留百分比的条件下，每个EV在37℃下孵育15分钟的cc-siRNA在100μL中1小时，在EV治疗的细胞中促进人抗原R（HuR,癌症治疗靶标）的浓度依赖性沉默。这些结果可能加速基于EV的疗法的发展。

EVs装载cc-siRNA的条件优化

从图中我们可以看出EVs装载cc-siRNA的条件，温度上42度最佳，37度次之；时间上1小时即够；体系上100 μL最佳；比例上EV/cc-siRNA=1:15最佳。

装载cc-siRNA的EVs的效果评价

参考文献：

Functional Delivery of Lipid-Conjugated siRNA by Extracellular Vesicles.Mol Ther. 2017 Apr 6. pii: S1525-0016(17)30120-X. doi: 10.1016/j.ymthe.2017.03.021. [Epub ahead of print]IF=5.048