线粒体膜电位(MMP)相关研究工具介绍
近年来研究发现多种细胞在不同因子作用下发生凋亡时均伴有线粒体膜电位(Mitochondrial membrane potential,MMP)的下降,线粒体氧化磷酸化过程中起偶联作用的MMP在细胞凋亡早期病理变化以前就开始下降,该过程早于DNA片段化,目前线粒体膜电位下降被广泛认为是细胞凋亡过程中最早发生的事件之一。
那么,什么是线粒体膜电位(MMP)呢?它的研究工具线粒体膜电位荧光探针又有哪些呢?咱们一起来看看吧!
1.TMRM
Tetramethylrhodamine, methyl ester (TMRM)也是一种可透过细胞膜的阳离子荧光染料,单激光激发和单荧光发射峰。可用543nm激光激发,发射橙红色荧光波长在580nm左右。相对其他荧光探针,TMRM具有许多优点如染料在线粒体积累仅源于膜电位变更;相对毒性更小;和细胞器结合率低;适合做线粒体膜电位的定量分析等。
2.Rhodamine 123
Rhodamine 123(罗丹明123)是一种可透过细胞膜的阳离子荧光染料,在正常细胞中能够依赖线粒体跨膜电位进入线粒体基质,荧光强度减弱或消失。在细胞凋亡发生时,线粒体膜完整性破坏,线粒体膜通透性转运孔开放,引起线粒体跨膜电位(ΔΨm) 的崩溃,Rh123 重新释放出线粒体,从而发出强黄绿色荧光,通过荧光信号的强弱来检测线粒体膜电位的变化和凋亡的发生,可用于培养的细胞或从组织中提取出的线粒体的膜电位检测。
3.JC-1
JC-1也称CBIC2(3),是一种广泛用于检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想荧光探针。可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。在线粒体膜电位较高时,JC-1聚集在线粒体的基质(matrix)中,形成聚合物(J-aggregates),可以产生红色荧光;在线粒体膜电位较低时,JC-1不能聚集在线粒体的基质中,此时JC-1为单体(monomer),可以产生绿色荧光。这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。JC-1单体可采用488或514nm激光激发,发出绿色荧光波长为529nm左右;JC-1聚合物(J-aggregates)的最大激发波长为585nm,发出红色波长为590nm。
关于以上研究工具,对应的研究产品有Cell Meter 线粒体膜电位测定试剂盒(货号:22804)何Cell Meter NIR线粒体膜电位检测试剂盒(货号:22803),不同的研究工具对应不同的线粒体膜电位变化,参考一下图表
用Cell Meter 线粒体膜电位测定试剂盒*适合流式细胞仪 橙色荧光*检测FCCP诱导的线粒体膜电位变化
用Cell Meter NIR线粒体膜电位检测试剂盒检*适合微孔板检测测FCCP诱导的线粒体膜电位变化