转基因小鼠构建技巧及方法

1974年，Rudolf Jaenisch通过将SV40 病毒的DNA注射到小鼠的囊胚中，创造了第一只携带外源基因的小鼠。后来又有研究人员把Murine leukemia病毒注射到小鼠胚胎得到了能通过生殖系统稳定遗传的小鼠，并且外源基因能在后代中稳定表达。这些能稳定遗传且表达外源基因的小鼠即我们一般意义上所说的转基因小鼠。

背景：当今转基因技术迅速发展，作为模式动物的小鼠在上世纪就已经有完整的转基因制备过程。虽然技术成熟但方法单一，所以需要进行发展和改进。

方法改进：

1.在小鼠品系的选择上需要注意，尽量选择容易受胎的品系。如ICR小鼠
2.在利用显微注射法制备转基因小鼠时，质粒浓度在1.5ng/ul，每次注射量在1pl左右。
3.注射后，3-5小时左右移植。

结果：能够明显提高转基因小鼠阳性率，受胎率，成活率。