绿色荧光蛋白转基因小鼠的生理生化常数

绿色荧光蛋白具有荧光稳定，检测方便，对活细胞无伤害等优点，已被作为一种标记基因应用到生物学研究的各个领域。中国医学科学院医学实验动物研究所使用的动物是将表达绿色荧光蛋白的基因导入小鼠体内，构建成能表达绿色荧光蛋白(GFP)的转基因小鼠。此种转基因小鼠可以利用光学成像技术跟踪靶细胞，是研究干细胞，肿瘤细胞的工具小鼠。目前国内外虽然有关于绿色荧光小鼠生理生化等各个检测指标的研究，但是还不足以建立一个针对绿色荧光蛋白转基因小鼠的生理指标平台。本实验旨在针对各不同周龄的绿色荧光蛋白转基因小鼠，全面测定其生理，生化，组织病理学各指标，为新药安全评价工作的深入展开提供科学的基础数据。论文发表在“中国实验动物学报”2011 年 4 月第 19 卷 第 2 期。

测定绿色荧光蛋白转基因小鼠不同年龄段的生理生化、组织病理学等方面的指标，为该品 种转基因小鼠应用于毒理学等领域研究提供理论依据。

方法 定期测定不同周龄段(4 ～ 6 周龄，6 ～ 8 周龄，9 ～ 12 周龄，13 ～ 14 周龄)141 只绿色荧光蛋白转基因(GFP)小 鼠 和 100 只 对 照 组 C57BL/6J 小鼠的体重和摄食量，对上述两种动物定期取血，测定血生化及血液学指标，对动物进行大体解剖，计算主要脏器(心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺，性腺)的脏器系数并进行组织病理学检测。

结果

①体重和摄食量:4 周龄的GFP小鼠，其体重明显低于对照组，差异具有显著性(P < 0. 01) ;4 ～ 5 周龄的 GFP 小鼠，其摄食量明显高于对照组，差异具有显著性(P < 0. 01)。

②血常规测定:6 ～ 8 周龄，9 ～ 12 周龄的 GFP 小鼠，其红细胞计数(RBC)明显低于对照组，差异具有显著性(P < 0. 01) ;9～ 12 周龄，13 ～ 14 周龄的 GFP 小鼠，其白细胞计数(WBC)明显高 于 对 照 组，差异具有显著性(P < 0. 01)。

③血生化测定:6 ～ 8 周龄，9 ～ 12 周龄，13 ～ 14 周龄的 GFP 小 鼠，其 尿 酸(UA)值明显高于对照组，差异具有显著性(P <0. 01) ;6 ～ 8 周龄，9 ～ 12 周龄的 GFP 小鼠，其总蛋 白(TP) ，白蛋白(ALB)明显低于对照组，差异具有显著性(P <0. 01)。

④脏器系数:6 ～ 8 周龄，9 ～ 12 周龄的GFP小鼠，其胸腺的脏器系数明显低于对照组，差异具有显著性(P< 0. 01) ;9 ～ 12 周龄，13 ～ 14 周龄的 GFP 小鼠，其肝脏的脏器系数明显高于对照组，差异具有显著性(P < 0. 01)。

⑤病理检测:6 ～ 8 周龄有部分GFP小鼠胸腺发育不良，其他受检脏器和其他年龄段动物未见明显病理改变。

结论

1.  绿色荧光蛋白转基因小鼠与对照组 C57BL/6J小鼠相比，在体重(4 周 龄)、摄食量(4～5周龄)、血常规(红细胞 计数 RBC、白细胞计数 WBC、血红蛋白 HGB)、血生化(尿酸 UA、总蛋白 TP、白蛋白 ALB)、脏器系数(胸腺，肝脏)等指标上存在明显差异，但是其值均在正常范围内。

2. 绿色荧光蛋白转基因小鼠在6～8周龄有部分小鼠胸腺发育不良。

在动物生长发育早期，绿色荧光蛋白转基因小鼠与对照组动物 C57BL/6J 小鼠比较，体重和摄食量明显降低，可能的原因是小鼠本身体质差异所致。本实验所用小鼠数量多，周龄范围广，对绿色荧光蛋白转基因小鼠进行了摄食、体重、血常规、血生化、病理等方面的检测，积累了各个周龄小鼠的丰富的生理生化数据，为转基因绿色荧光蛋白小鼠的深入研究建立了系统化的资料库。

原创作者：贺晓玉 何君 徐艳峰 秦超 高虹

原创单位：中国医学科学院医学实验动物研究所 北京协和医学院比较医学中心 卫生部人类疾病比较医学重点实验室

发表杂志：中国实验动物学报 2011年4月 第19卷 第2期