技术达人精品课20171206-王华【Q&A】(上)
在《常规制片的技术细节与常见问题的解决思路》直播中,小伙伴们参与热情太太太高,提出了30多个问题,高效的王华老师,已经全部解答完毕!由于篇幅限制,小衡将分上下两篇推送给大家,先来看看上篇吧。
云水
怎么判断配的苏木素是合格的?
王华
可以通过以下几个方面判断:1、苏木素染液在有效期内;2、染液性状正常,没有明显沉淀和氧化膜;3、用于HE染色,细胞核颜色正常,500ml染液至少能染500张切片以上(最重要,需要有经验的技术员通过使用后验证其染色能力)。
红薯
感谢老师的分享,想请教老师像肌组织过硬跳刀问题。
王华
肌肉组织过硬,最常见的原因是组织脱水不良引起。
莫小小
当HE 片出现染色的问题的时候医生没听你解释就认定是技术员染色切片问题,该肿么办?
王华
首先得问问,为什么医生不相信你的解释?您自己知道切片染色出现了什么问题吗?您能分析是什么原因引起吗?有没有足够的依据与知识去与医生探讨?
要别人信你,就得展示出自己具有足够的专业知识与素质。别人的尊敬与信任是靠自己的能力积累起来的。要用自己的专业素养赢得别人的尊重与信任。
晴空万里陈平
王老师,子宫内膜的容易污染,我们用滤纸包起来,又不容易处理透,有什么好方法减少污染又把标本处理的很好?
王华
如果如您所说用的是滤纸,滤纸太厚了,会影响组织脱水时试剂的交换,导致脱水不良。我建议您换成薄的绵纸(如茶包纸)包组织。当然,包的组织也不能太多太紧,否则也是影响组织脱水效果的。
明明
细胞核呈紫色,并非是蓝色,和脱水差关系大么?还是苏木素的问题呢?
王华
从组织固定、脱水、染色等环节,都会影响HE染色效果。
您得自己根据上课时的问题思考的思路,先看看显微镜下组织的形态结构是否正常,判断是染色的原因,还是染色前的原因。自己学会分析找到问题的原因。
小丽
有没有一种便宜点的普通刀来代替切片刀呢?
王华
没有物美价廉的,只有物美价宜。
筱时光烘焙工作室
请问老师,有的医院封片时用的胶再添加一些二甲苯是为了什么?
王华
传统的中性树胶以二甲苯为溶剂,当胶比较稠的时候不好封片,就用二甲苯稀释变稀一些以利操作。
紫色梦影
王老师要是中午没做完最好可以放在无水乙醇还是二甲苯里好呢?
王华
建议放在二甲苯里。放在酒精里,时间长了也会把伊红溶解出来,导致伊红变淡。
莫小小
王老师,二甲苯透明了放到通风柜还没晾干的时候,二甲苯不会和空气中的水汽产生雾化吗?不是应该要快速湿封片吗?
王华
如果二甲苯里残留有酒精,就会出现片子“雾化”的现象。 如果用的是机器封片,透明后就尽快封片,如果手工封片,那就根据你们科室的通风情况决定是否让二甲苯挥发一点再封片。
思源
王老师,苏木素染色分化的时候,苏木素用了大概一个月左右,分化的时候原来紫色分后颜色变化不明显,我就把分化盐酸酒精新配了1%的盐酸酒精。结果我提插4次,还是颜色变化不明显,是室温低了,还是该换苏木素了?谢谢。
王华
使用了一个月的苏木素,也该更换了。至于分化液对苏木素的影响不明显,请确认分化液的盐酸的质量。
小丽
我们用中性快干胶封片,里面已经加了一定量的二甲苯,最后脱水到无水乙醇,吹风机吹吹,然后直接封片。这样会像您说的会影响细胞的饱满度么?
王华
酒精脱水后直接吹干封片是一定会影响细胞的饱满度的。您自己可以做个对比实验看看,还是差异挺大的。
可笑青春
王老师,我们染色新换的伊红,没染伊红之前,核很蓝的,染完之后就灰灰的,是不是您说的伊红染液里偏酸。我们染液是商品化的,开封后放置时间有两三个月了。
王华
你们的伊红是否偏酸我不知道。您可以再找其他的伊红染色液做个比对看看。
孙红霞
王老师最近我们的宫内膜组织脱水后感觉也是像血块一样。我取材是用纱布包的,是怎么回事哦?之前的都不像那样。
王华
这个你得自己找原因了,因为我从您提供的线索来看,并不知道你哪里出现了怎样的细节变化。
Ci點解
王老师,刚才讲的脱水不够,组织没有充分脱水,导致蜡块中间部分水分没有脱充分,那请问,切片感觉组织脆,容易掉,切片有裂隙,是不是脱水过度了?请问脱水机剃度酒精的脱水时间怎么调节,怎么去把握?谢谢。
王华
亲,脱水的知识点请看直播回放有关脱水的内容,我就不额外补课了。
恺溦
王老师,带有粘液的组织he染出来总有很多蓝色的杂质,如何解决?
王华
我不知道我理解的“杂质”与您说的“杂质”是不是一个模样,建议拍图私信发给我再聊。
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