腺相关病毒纯化流程

腺相关病毒属微小病毒科( parvovirus)，为无包膜的单链线状 DNA 病毒。AAV 的基因组约 4700bp，包括上下游两个开放读码框架(ORF)，位于分别由 145 个核苷 酸组成的2 个反向末端重复序列(ITR)之间。

腺相关病毒纯化流程：

1） 向病毒浓缩液中添加固体 CsCl 直到密度为1.41 g/ml（折射率为1.372）；

2） 将样品加入到超速离心管中，用预先配好的 1.41 g/ml CsCl 溶液将离心管剩 余空间填满；

3） 在 175,000 g 下离心24 小时，以形成密度梯度。按顺序分步收集不同密度的 样品，取样进行滴度测定。收集富集有AAV 颗粒的组分；

4） 重复上述过程一次。

5）将病毒装入100 kDa的透析袋，4度透析脱盐过夜。此即为纯化的AAV病毒