CDX动物模型构建操作流程
建立理想的肿瘤动物模型是抗肿瘤研究中很重要的环节,对肿瘤学基础和治疗研究具有举足轻重的作用。移植性肿瘤动物模型指将动物或人体肿瘤移植到同种或异种动物体内连续传代而形成的肿瘤。该实验法是抗肿瘤药物筛选最常用的体内方法,目前临床上常用的抗肿瘤药大多是首先经该实验法而被发现的。人源肿瘤小鼠异种移植模型是目前应用最多的模型,CDX(cell-line-derived xenograft)模型是其中应用最广泛的一种。该模型将人源的细胞系接种到免疫缺陷鼠体内,研究肿瘤细胞在动物体内的增殖特性,某基因在肿瘤中的功能以及药物对肿瘤的治疗作用等。CDX模型使用的小鼠品系包括BALB/C-nude、nu/nu、SCID、NOD-scid等,成瘤部位可以为皮下、肾包膜下、原位、腹腔(实体瘤)或静脉(非实体瘤)。其中,皮下成瘤是肿瘤成瘤研究中最常用的模型,只需要把肿瘤细胞接种到裸鼠的前肢腋下或背部皮下等位置即可。该模型操作简单方便, 可以直观观察肿瘤的生长,方便检测动物体重、肿瘤生长曲线、肿瘤重量等重要数据。可以对组织和体液样本进行相关分析,广泛应用于生物医学研究与药物开发。肾背膜下成瘤即把肿瘤细胞接种到免疫缺陷鼠肾背膜下,该方法适合不易成瘤的肿瘤细胞或组织。原位移植以发生肿瘤的器官为移植点,需要采取开放手术打开暴露相应肿瘤发生器官,将肿瘤组织或肿瘤细胞种植到器官内。此方式因不易操作,且小鼠手术后死亡率较高,一般不常选用。
成瘤部位
常用肿瘤模型的测量指标
应用
1)肿瘤治疗新药研发;
2)个体化医疗用药指导;
3) PDX样品资源库;
4) Biomarker与新药靶点。
实验流程
实验流程示意图
1)人源肿瘤细胞系培养及接种前处理;
2)肿瘤细胞接种;
3)定期观察并记录动物体重、肿瘤体积变化,待肿瘤体积长大到100mm3时给药/处理;
4)给药/处理,继续观察并记录小鼠体重、肿瘤体积变化;
5)根据实验设计结束实验,或者在动物肿瘤体积增大到1000mm3时处死动物;
6)留取肿瘤、主要器官、血液等生物样本备用。