载体构建技术基本流程

1.载体质粒的选择；

2.引物设计；

3.PCR扩增；

4.载体和目标片段的限制性酶切；

5.连接转化；

6.挑取克隆提质粒验证。

重要的是，我们要为大家提供了一个载体构建流程模板，构建载体时希望大家可以创建一个word文档，按照我们提供的模板，将载体构建过程记录下来，便于后续优化。后续文章中我们将举例告诉大家如何使用这个模板。

P.S. 构建表达载体时可以先连接T载体，可把步骤（12）酶切片段换成连接T载体后再对T载体进行酶切。连接T载体会多花一天时间，但是可以使载体构建流程更顺利。连接T载体与连接目的载体方法十分类似，本次举例不再涉及。如果想要通过连接T载体过渡，可以网上搜索T载体相关产品说明书，了解T载体和连接T载体的方法。

引物设计的内容我们将放在接下来的一篇推送里，正在构建载体的大家，先尝试使用我们的载体构建流程模板吧。